YAP抑制结肠癌细胞自噬的分子机制研究.docx

目录

第一部分YAP抑制结肠癌细胞自噬的分子机制研究TOC\o1-3\h\u

3331前言 1

301011材料与方法 2

292911.1实验材料 2

67771.1.1细胞 2

163991.1.2质粒 2

188731.1.3抗体 2

6151.1.4siRNAoligo序列 2

185731.1.5主要仪器 2

46031.1.6主要试剂 4

237481.1.7主要溶液配制 4

223011.2实验方法 7

102711.2.1细胞培养 7

175061.2.2质粒提取 8

49761.2.3细胞转染 9

14601.2.4免疫印迹 9

286221.2.5动物实验 11

44141.2.6免疫荧光 12

262111.2.7CO-IP实验 12

288061.2.8ChIP-qPCR 13

213981.2.9Dual-LuciferaseReporter实验 13

29191.3统计方法 14

206462结果 14

194012.1进一步证明YAP抑制结肠癌细胞自噬作用 14

17702.1.1体外实验敲低YAP的结果 14

267102.1.2动物实验证明过表达YAP的结果 15

6002.2YAP通过上调Bcl-2的结果 16

218712.2.1过表达YAP上调Bc1-2的表达结果 16

94752.2.2敲低YAP下调Bcl-2的表达结果 17

59352.2.3YAP通过上调Bcl-2的表达结果 18

111722.2.4YAP调控Bcl-2的转录活性的结果 18

174822.3YAP与转录因子TEAD结合上调Bcl-2的表达结果 19

295592.3.1过表达TEAD上调Bc1-2的结果 19

186872.3.2敲低TEAD下调Bcl-2的表达结果 20

296802.3.3YAP与TEAD相互作用结果 20

129162.3.4YAP与TEAD的结合调控Bc1-2的表达结果 21

130693讨论 22

17744结论 23

29392参考文献 24

28072致谢 25

13402第二部分文献综述

8839引言 26

64981自噬的分子调节通路 26

61681.1Hippo信号通路 26

153141.2mTOR信号通路 28

215041.3RAS信号通路 28

62911.4AMPK信号通路 28

76692自噬与肿瘤 29

258973癌症中的自噬诱导因子 30

223813.1Beclin1 30

325623.2Tp53 30

188494发展方向 31

114665小结 32

25822参考文献 33

长治医学院本科毕业论文（设计)

第一部分：YAP抑制结肠癌细胞自噬的分子机制研究

摘要

目的：本课题旨在研究YAP（Yes-associatedprotein,YAP）抑制结肠癌细胞自噬的分子机制，为临床上治疗结肠癌寻找新靶点。方法：在深入探究YAP在结肠癌细胞自噬中的功能时，本文观察记录自噬小体的动态变化，并检测YAP对LC3-I（微管相关蛋白轻链3-I）和Bcl-2（B淋巴细胞瘤-2基因）表达的具体影响。通过细致的分析，揭示YAP与Bcl-2启动子的结合情况，并探讨YAP与TEAD（转录增强因子家族成员）之间的相互作用。通过对这些数据的统计分析，得出结论。结果：免疫荧光和电镜显示YAP调控结肠癌SW620细胞（人结肠癌细胞）自噬小体数量。Westernblot表明YAP影响LC3I和Bcl-2表达。ChIP-qPCR和Dual-Luciferase揭示YAP上调Bcl-2转录。TEAD（TEAD转录因子1-4）与YAP共同调控Bcl-2。Verteporfn破坏YAP-TEAD作用，降低Bc1-2表达。结论：在结肠癌细胞的研究中，本文发现YAP（Yes-associatedprotein）的表达水平对细胞自噬现象有显著影响。具体而言，过表达YAP可以抑制结肠癌细胞的自噬，而敲低YAP则促进细胞自噬。进一步研究表明，YAP可能通过上调Bcl-2（B-celllymphoma2）的表达来抑制细胞自噬，因为Bcl-2是一种已知的细胞凋亡抑制蛋白。机制分析揭