酶的发酵生产.ppt

产酶模式不同，产酶速率与细胞生长关系也不同：同步合成型酶，产酶速率与细胞生长同步，?=0：中期合成型酶，为特殊的生长偶联型，其产酶动力学与同步合成型相同；但在阻遏物存在时?=0，无酶的合成；解除阻遏后才有酶的合成。滞后合成型酶，为非生长偶联型，?=0：延续合成型酶，为部分生长偶联型：dE=??XdtdE=?XdtdE=(??+?)Xdt第32页,共40页，星期六，2024年，5月基质消耗动力学基质消耗动力学主要研究发酵过程中基质消耗速率以及各种因素对基质消耗速率的影响。发酵过程中的基质消耗速率：-dS/dt用于细胞生长的基质消耗速率：（-dS/dt）G用于产物生成的基质消耗速率（-dS/dt）P用于维持细胞代谢的基质消耗速率：（-dS/dt）M第33页,共40页，星期六，2024年，5月第五节动植物细胞培养生产酶利用动植物细胞培养生产各种天然物质，是生物工程的一个新领域，20世纪80年代以来，利用植物细胞培养生产的有用产物已达100多种，其中酶制剂有10多种。包括糖苷酶(胡萝卜细胞，1981)，过氧化物酶(甜菜细胞，1983；大豆细胞，1989)等。呈现出良好的发展前景.第34页,共40页，星期六，2024年，5月一、动植物细胞的特点:1、体积比微生物大；2、对剪切力敏感；3、生长和代谢速率低，生长倍增时间和发酵周期长；4、动物细胞营养要求复杂；5、发酵产物不同第35页,共40页，星期六，2024年，5月二、植物细胞培养和发酵1、植物细胞发酵技术和特点：植物细胞发酵技术发酵特点（与直接提取分离相比较而言）：（1）提高产率；（2）缩短周期;（3）易于管理、减轻劳动强度；（4）提高质量。第36页,共40页，星期六，2024年，5月2、植物细胞发酵技术工艺流程外植体－细胞的获取－细胞培养－分离纯化－产物第37页,共40页，星期六，2024年，5月3、植物细胞发酵产酶的工艺条件控制（1）植物细胞生长和发酵所使用的培养基：大量无机盐、维生素和植物激素、无机氮源、碳源（蔗糖）MS培养基和B5培养基（2）温度和pH值（3）通风与搅拌（溶解氧）（4）光照的控制（4）前体的添加（5）刺激剂的应用第38页,共40页，星期六，2024年，5月三、动物细胞发酵1、动物细胞可以生产多种具有较高价值的药物，特别是疫苗、激素、多肽生长因子、酶、单克隆抗体和非抗体免疫调节剂等。由动物细胞培养生产的酶有胶原酶，血纤蛋白溶酶原活性剂等。2、动物细胞培养方法：悬浮培养；贴壁培养；固定化细胞培养3、动物细胞发酵工艺条件的控制第39页,共40页，星期六，2024年，5月感谢大家观看第40页,共40页，星期六，2024年，5月**关于酶的发酵生产2.1酶生物合成的基本理论2.1.1RNA的生物合成——转录2.1.2蛋白质的生物合成——翻译2.1.3酶生物合成的调节第2页,共40页，星期六，2024年，5月一、RNA的生物合成——转录转录是以DNA为模板，以核苷三磷酸为底物，在RNA聚合酶（转录酶）的作用下，生成RNA的过程。第3页,共40页，星期六，2024年，5月二、蛋白质的生物合成——翻译翻译：以mRNA为模板，以氨基酸为底物，在核糖体上通过各种tRNA，酶和辅助因子的作用，合成多肽的过程。四个阶段1、氨基酸活化生成氨酰－tRNA2、肽链合成的起始3、肽链的延伸4、肽链合成的终止第4页,共40页，星期六，2024年，5月第5页,共40页，星期六，2024年，5月第6页,共40页，星期六，2024年，5月肽链的终止，释放和修饰终止密码子释放因子肽链的修饰第7页,共40页，星期六，2024年，5月操纵子模型（operonmodel)：是原核生物基因表达的调节机制。大肠杆菌乳糖操纵子是第一个被子发现的操纵子（Monod和Jacob，1961）操纵子及调节基因示意图三、酶生物合成的调节第8页,共40页，星期六，2024年，5月酶合成调节的类型：诱导和阻遏1、酶合成的诱导乳糖诱导?-半乳糖苷酶的合成淀粉诱导a-淀粉酶的合成第9页,共40页，星期六，2024年，5月①乳糖操纵子的结构E.coli能利用乳糖作为碳源，而利用乳糖作为碳源的酶只有当乳糖成为唯一碳源时才被合成。乳糖操纵子由三个结构基因（lacZ、lacY和lacA）、操纵基因Olac、启动基因Plac、和调节基因lacI所组成（图）lacZ，编码β-半乳糖苷