- 1、本文档共12页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
小分子肝素的制备LOGO陈紫娟
1234概述制备方法酶活测定方法及分子量测定方法实验进度及问题
v肝素(Unfractionatedheparin,UFH)作为抗凝剂和抗血栓药在临床上使用已有60余年,但长期使用会导致出血和血小板减少等不良现象。v低分子肝素(Low-molecular-weightheparin,LMWH)是由普通肝素裂解而来。与普通肝素比较,其抗血栓能力较强而抗凝血能力较低,在其抗血栓能力形成时对凝血系统的影响较小。另外低分子肝素还具有分子量小、生物利用度高、体内半衰期长、出血倾向小等特点,因此低分子肝素的制备具有重要的意义。
v根据其末端链的差异和制备方法的不同,低分子肝素主要分为八种。平均分子量制方法FXa/FⅡa的比例末端那屈肝素依肝素达肝素舍托肝素亭扎肝素瑞维肝素阿地肝素帕肝5000400080004900硝酸降解乙醇分苯甲化并碱降解亚硝酸降解凝胶过滤亚硝酸异戊酯降解肝素酶降解3.63.82.04.21.95.01.92.02,5-脱水-D-甘露糖还原末端4,5-不饱和糖醛酸非还原末端2,5-脱水-D-甘露糖还原末端2,5-脱水-D-甘露糖还原末端4,5-不饱和糖醛酸非还原末端2,5-脱水-D-甘露糖还原末端不稳定的糖苷键400060005000亚硝酸降解过氧化氢降解过氧化氢降解不稳定的糖苷键
制备方法物理分离法化学裂解法有机溶剂分级沉淀法、凝胶色谱法、亲和色谱法、离子交换色谱法和超滤法(不适用与工业化生产)亚硝酸降解法、过氧化氢降解法、β-消除降解法和其它化学降解法酶解法肝素酶
2.1化学降解法v亚硝酸降解法1%醋酸溶液亚硝酸钠降解液氢氧化钠中和中和液肝素钠-5~30℃,3.5h无水乙醇沉淀丙酮脱水,干燥低分子肝素该解聚肝素的过程受温度、溶液pH值、亚硝酸盐的浓度及降解时间的影响较大。
2.1化学降解法v2.1.2过氧化氢降解法肝素钠乙酸钠溶液抗坏血酸、乙酸铜水溶液溶液边搅拌边加入过氧化氢PH7.8PH7.8PH7.8,40℃,24h真空浓缩浓缩液EDTA钠盐中和液无水甲醇干燥反应液沉淀低分子肝素该法制备LMWH的过程也主要受反应的温度、pH值和过氧化氢浓度的影响
2.1化学降解法v2.1.3β-消去降解法β-消除降解法包括肝素季铵化和降解两步处理。肝素的季铵盐和卤代烃或卤代苄基化合物在二氯甲烷或二甲基甲酰胺中可以发生酯化反应,生成的肝素酯可在碱性条件下水解成LMWH。肝素解聚程度可由酯化率,碱性条件或酯的类型决定。v其它化学降解法v除亚硝酸降解、β-消除降解法和过氧化氢降解这三种工业上用来制备LMWH的化学方法以外,还可采用高碘酸降解、次氯酸降解、γ-照射和硫酸一氯磺酸降解等几种方法制备LMWH。这几种制备方法目前没有其投入工业化生产的报道。
2.1化学降解法v优点:化学裂解法工艺简单,成本低廉,适宜工业化生产。v缺点:化学裂解法在裂解过程中容易导致硫酸基丢失ATlll一结合部位减少,同时其在裂解过程中易引入有毒物污染环境。
2.2酶解法v肝素的酶法降解己经被用作分析肝素的结构和制备LMWH。肝素酶是能特异性的裂解肝素和类肝素主链糖苷键的酶,最初是从肝素黄杆菌(Flavobacteriumheparinum)中发现并分离。后在一些其它的微生物和真核生物中也有发现,如拟杆菌属、棒杆菌属和芽孢杆菌属等几种,真核生物的霉菌、胎盘、胸腺、血小板等中均有发现。v肝素酶主要用于低分子肝素生产和链上精确结构的研究,现在市场上肝素酶价格昂贵且都是肝素黄杆菌肝素酶,这是由于分离肝素酶稳定性差及产量不高所造成的。
2.2酶解法相较化学裂解法,酶解法裂解环境温和、对环境无污染,但目前市场上售卖肝素酶,价格昂贵,且均是肝素黄杆菌肝素酶。为了降低肝素酶的价格,可尝试以下三条途径:生化微生物方法基因工程方法方法进一步研究肝素酶的结构、性质,提高分离纯化效率。构建高效表达且不易产生包涵体的基因工程菌筛选新的高效产酶菌株
AddyourcompanysloganLOGO
您可能关注的文档
- 2024-2030年表面贴装技术(SMT)胶带行业市场现状供需分析及重点企业投资评估规划分析研究报告.docx
- 2024-2030年袋码垛机行业市场现状供需分析及重点企业投资评估规划分析研究报告.docx
- 2024-2030年裁缝剪行业市场现状供需分析及重点企业投资评估规划分析研究报告.docx
- 2024-2030年装饰枕头行业市场现状供需分析及重点企业投资评估规划分析研究报告.docx
- 2024-2030年褶膜式过滤筒行业市场现状供需分析及重点企业投资评估规划分析研究报告.docx
- 2024-2030年西装行业市场深度调研及供需格局与投资前景研究报告.docx
- 小型水库工程课件.ppt
- 2024-2030年视力保健产品行业市场现状供需分析及市场深度研究发展前景及规划投资研究报告.docx
- 2024-2030年视觉检测行业发展分析及前景趋势与投资研究报告.docx
- 2024-2030年视频输入接口行业市场现状供需分析及重点企业投资评估规划分析研究报告.docx
文档评论(0)