遗传信息的传递专家讲座.pptx

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第二章

遗传信息传递;第一节中心法则;即遗传信息从DNA传递至RNA,再传递至多肽。DNA同RNA之间遗传信息传递是双向,而遗传信息只是单向地从核酸流向蛋白质。;第二节DNA生物合成;包含:DNA指导下DNA复制和RNA指导下反转录两种方式。;2.DNA复制属性;

;?四个9bp重复序列

dnaA结合位点;;;单向复制;DNA复制起始点和复制叉;复制眼(replicationeye):电子显微镜下观察正在复制DNA,复制区域形如一只眼睛。;真核生物多复制子多个复制眼;遗传信息的传递专家讲座;;;(1)DNA聚合酶(DNApolymetases)

(2)引物酶(peimase)和引发体(primosome):开启RNA引物链合成。

(3)DNA连接酶(DNAligase)

(4)DNA解螺旋酶(DNAhelicase)

(5)单链结合蛋白(single-strandbindingprotein,SSB):结合在解开DNA单链上,预防重新形成双螺旋。

(6)拓扑异构酶(topoisomerase):兼具内切酶和连接酶活力,能快速将DNA超螺旋或双螺旋担心状态变成松驰状态,便于解链。;;;;;;;;;大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ中亚基;;;DNApolⅠ和DNApolⅢ主要特征和功效比较;2、子链DNA延伸方向只能是5’-3’:二者都有。;3、3’-5’外切核酸酶活性:二者都有。

校对功效(proofreading);4、5’-3’外切核酸酶活性:只有DNApolⅠ含有。

DNApolⅠ5’-3’外切活性有以下三个特点:

?必须有5’-磷酸末端

?被除去核苷酸必须是已经配正确

?被除去能够是脱氧核糖核苷酸,也能够是核糖

核苷酸;;;;;遗传信息的传递专家讲座;;DNA双螺旋本身深入盘绕称超螺旋。超螺旋有正超螺旋和负超螺旋两种。负超螺旋存在对于转录和复制都是必要。

正超螺旋:两股以右旋方向缠绕螺旋,在外力往紧缠方向捻转时,会产生一个左旋超螺旋,以解除外力捻转造成胁变。这么形成螺旋为正超螺旋。

负超螺旋:两股以右旋方向缠绕螺旋在外力向松缠方向捻转时,产生一个右旋超螺旋以解除外力捻转造成胁迫。这么形成超螺旋为负超螺旋。;正超螺旋;正超螺旋为双螺旋旋转过分,经过分子整体左旋来解去过分螺旋。

;分子整体右旋一圈来补双螺旋上一圈不足。;;原核拓扑异构酶Ⅰ作用机制:

①酶与DNA结合使双链解旋;

②使一条链切开,但酶与切口两端结合阻止了螺旋旋转;

③酶使另一条链经过缺口,然后再将两断端连接起来;

④酶从DNA上脱落,两条链复原。;;;Replicationmachinery;

引物酶和引发体

引物酶(primase):

依赖DNARNA聚合酶。

催化RNA引物合成。

RNA引物:

在DNA模板复制起始部位由引物酶催

化NTP聚合,形成短片段RNA,为DNA

聚合提供3′-OH末端。;

引发体(primosome):

是由DnaB、DnaA、DnaC以及其它复制

因子一起形成复合体,再结合引物酶形成

较大聚合体,结合到模板DNA上。

复制开始时,在引发体下游解开双链,

再由引物酶催化引物合成。;;;

所需条件:

a、切刻3’-OH和5’-P相邻

b、切刻各自碱基处于配对状态

c、需要能量:原核(ATP、NAD)

真核(ATP);遗传信息的传递专家讲座;在复制中用途:DNA链合成后引物被切除,并被DNA替换。此时DNA链上仍存在缺口,DNA连接酶会催化形成磷酸二酯键,将断裂缺口连上,形成完整DNA链。;连接酶连接切口;;;引发体(引物酶作用下)在原点处合成一小段RNA引物(10-60个碱基不等)。引物合成方向也是5′→3′方向,然后由DNA聚合酶合成DNA链。前导链合成一个引物,滞后链断续合成多个引物。;;

;;;在DNA复制中,DNA新链合成是沿5′→3′方向进行。因为DNA分子两条链是反向平行,所以分别以两条链为模板DNA链复制方式是不一样。一条连续合成,另一条不连续合成。;DNA一条链复制以3′→5′DNA母链为模板,DNA链复制是沿5′→3′方向连续进行,称为前导链。

另一条以5′→3′DNA母链为模板

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