《动物细胞制药》课件.pptxVIP

《动物细胞制药》课程介绍本课程介绍了动物细胞制药的理论和实践知识。我们将探讨动物细胞培养、基因工程和生物反应器技术。zxbyzzzxxxx

动物细胞制药的定义和特点1定义动物细胞制药是指利用动物细胞作为生物反应器，通过生物技术手段生产药物、疫苗和诊断试剂等生物制品。2特点动物细胞制药具有安全、高效、高纯度和高附加值等特点，在现代医药产业中发挥着越来越重要的作用。3优点与传统药物相比，动物细胞制药的药物具有更强的生物活性、更高的靶向性和更少的副作用，能够更有效地治疗疾病。4应用领域动物细胞制药的应用领域非常广泛，包括抗体药物、疫苗、细胞治疗、基因治疗和诊断试剂等。

动物细胞培养的基本原理1细胞的体外生长动物细胞培养是将动物细胞从机体中取出，在人工控制的环境下进行培养，使其生长繁殖并保持其生物学特性。2培养基的营养支持培养基是提供细胞生长所需的营养物质、生长因子、激素和无机盐的液体或固体培养基。3环境条件的控制温度、pH值、气体浓度和渗透压等环境因素对于动物细胞的正常生长繁殖至关重要。

动物细胞培养基的组成基本营养物质包括氨基酸、维生素、无机盐等，为细胞提供生长和代谢所需的基本营养物质。能量来源主要为葡萄糖和谷氨酰胺，为细胞提供能量，支持细胞生长和分裂。生长因子促进细胞生长和增殖，如胰岛素、转化生长因子等，可根据细胞类型选择添加。缓冲剂维持培养基的pH值稳定，防止细胞因pH值变化而受到影响。

动物细胞培养的环境条件温度动物细胞培养需要严格控制温度，一般在37℃左右，保持恒定温度，有利于细胞生长和代谢。pH值培养基的pH值对细胞的生长和代谢有重要影响，一般控制在7.2-7.4之间。氧气动物细胞培养需要充足的氧气，一般采用通气或搅拌的方式来提供氧气。二氧化碳培养基中需要添加一定量的二氧化碳，以维持培养基的pH值稳定。

动物细胞培养的基本操作无菌操作动物细胞培养需要严格的无菌操作，避免微生物污染。操作人员需要穿戴无菌服、戴口罩、手套和帽子，并在无菌操作台上进行操作。细胞接种将细胞悬液接种到培养瓶或培养板中，并在适宜的环境条件下进行培养。接种密度需要根据细胞类型和实验目的进行调整。培养基更换定期更换培养基，以提供新鲜的营养物质和去除代谢产物，维持细胞的正常生长和代谢。更换频率取决于细胞类型和培养条件。细胞传代当细胞生长到一定密度时，需要进行传代，即将部分细胞转移到新的培养瓶或培养板中，以继续培养。传代时需要进行细胞计数，并根据细胞密度调整接种量。细胞冻存将细胞悬液与冻存液混合，并将其置于液氮罐中保存。冻存可以保存细胞的活力，以便在需要时进行恢复培养。

动物细胞株的建立和鉴定动物细胞株是进行生物制药研究和生产的重要基础。建立稳定、高效的细胞株是动物细胞制药的核心技术之一。1细胞分离从动物组织中分离出目标细胞。2细胞培养在体外培养条件下进行细胞增殖和传代。3细胞克隆筛选出具有优良特性的单克隆细胞。4细胞鉴定通过形态学、遗传学、免疫学等方法对细胞株进行鉴定。细胞株的鉴定可以确保细胞株的稳定性和安全性，是保证生物制药产品质量的重要环节。

动物细胞生长动力学的测定动物细胞生长动力学是指细胞在培养过程中数量变化的规律。它反映了细胞增殖、凋亡、分化等过程的动态平衡。1细胞计数法利用血球计数板或流式细胞仪等方法进行细胞计数。2比色法利用细胞中特定物质的含量与细胞数量成正比关系，通过测定这些物质的含量来间接反映细胞数量。3生物量测定法通过测定细胞的干重、蛋白含量或DNA含量等参数来反映细胞数量。常用的测定方法包括细胞计数法、比色法和生物量测定法。通过这些方法可以得到细胞生长曲线，并分析细胞的生长速率、生长周期等参数。

动物细胞代谢活性的测定动物细胞代谢活性是指细胞进行生命活动所需的各种代谢过程的强度和效率。通过测定细胞代谢活性，可以了解细胞的生长状态、功能状态和健康状态。1细胞计数测定细胞数量，反映细胞生长和增殖情况。2MTT法测定细胞活力，反映细胞的存活率和代谢能力。3LDH法测定细胞膜的完整性，反映细胞的损伤程度。动物细胞代谢活性的测定方法有很多，常用的方法包括细胞计数法、MTT法、LDH法等。

动物细胞生产产品的分离纯化细胞培养液分离细胞培养液中含有大量的细胞碎片、培养基成分、杂蛋白等，需要进行初步分离，以去除这些杂质。细胞裂解和蛋白质提取细胞破碎后，可以利用超声波、高压均质器等方法将细胞裂解，释放出目标蛋白。纯化技术常用纯化技术包括盐析、层析、超滤、电泳等，根据目标蛋白的特性选择合适的纯化方法。产品纯度检测利用SDS、HPLC、质谱等方法检测目标蛋白的纯度，确保产品质量。

动物细胞生产产品的质量控制1原辅料控制严格控制原辅料质量，包括细胞培养基、血清、试剂等，确保其符合生产要求。2生产过程控制严格控制生产过程中的关键参数，例如温度、p