DB34T-禽白血病通用AJ三重PCR检测技术规程.pdf

ICS11.220

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B41

安徽省地方标准

DB34/XXXXX—20XX

禽白血病通用/A/J三重PCR检测技术规程

Technicalprotocolforgeneric/A/JtriplePCRdetectionforavianleukemia

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（征求意见稿）

XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX

安徽省市场监督管理局发布

DB/XXXXX—XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》规定起草。

请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。

本文件由安徽省动物疫病预防与控制中心提出。

本文件由安徽省农业农村厅归口。

本文件起草单位：安徽省动物疫病预防与控制中心等。

本文件主要起草人：沈艳等。

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DB/XXXXX—XXXX

禽白血病通用/A/J三重PCR检测技术规程

1.范围

本文件规定了禽白血病通用/A/J三重PCR检测方法的主要仪器设备、试剂、引物、样品处理、样

品DNA/RNA提取、反转录、多重PCR扩增、结果判定。

适用于禽白血病病毒核酸通用/A/J的三重PCR检测。

2.规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注明日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于

本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T541兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范

GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求

GB19489实验室生物安全通用要求

《病死及病害动物无害化处理技术规范》（农医发〔2017〕25号）

3.术语与定义

下列术语与定义适用于本文件。

3.1

禽白血病病毒Avianleukosisvirus

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禽白血病病毒是反转录病毒科（Retroviridae）成员，根据病毒囊膜糖蛋白抗原特异性、病毒干扰试

验及宿主范围，ALV被分为11个亚群（A~K）。其中，对鸡具有致病性的外源性ALV主要包括A、B、

和J亚群。

4.主要仪器设备

4.1PCR扩增仪。

4.2台式高速冷冻离心机：可控温至4℃，离心力12000g以上。

4.3全自动组织快速碾磨仪。

4.4涡旋震荡器。

4.5核酸电泳仪。

4.6凝胶成像系统。

4.7可调微量移液器：最大量程分别为10μL、50μL、100μL、1000μL。

4.8电子天平：精确度0.001g。

5.试剂

5.1病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒和反转录试剂盒：商品化试剂。

5.2