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N6-甲基腺嘌呤甲基转移酶新组分WTAP筛选及初步鉴定的开题报告

研究背景与目的：

N6-甲基腺嘌呤（m6A）是一种重要的RNA修饰，它在许多生物体内都起着重要的作用。m6A修饰是通过m6A甲基转移酶（MTase）来完成的。其中，N6-甲基腺嘌呤甲基转移酶（METTL3）和N6-甲基腺嘌呤甲基转移酶-样蛋白（METTL14）是目前最重要的两种m6A甲基转移酶。然而，最新的研究表明，还存在一种新的m6A甲基转移酶，即N6-甲基腺嘌呤甲基转移酶新组分（WTAP）。WTAP不仅可以影响m6A的形成，还可以与其他蛋白互作，参与到许多重要的细胞过程中。本研究旨在筛选出WTAP的候选分子并对其进行初步鉴定。

研究方法：

1.cDNA文库构建：首先，使用转录组测序技术对不同组织的RNA样品进行测序，并对结果进行比对和分析，筛选出最具代表性的组织作为进一步研究的对象。接下来，使用聚合酶链式反应技术（PCR）扩增所选组织的cDNA，将其构建成文库。

2.蛋白质亲和纯化：将潜在的WTAP结合蛋白质合成并结合至配置的亲和性树脂当中，通过洗脱和纯化样品来提高目标蛋白质的纯度。

3.质谱鉴定：通过质谱技术对纯化后的蛋白样品进行分析，确定鉴定出的蛋白是否为WTAP，并对其序列和结构进行分析。

4.功能验证：采用组织培养和RNA亲和性富集等技术对WTAP进行功能验证。

预期成果：

1.筛选出一批WTAP的候选分子。

2.对WTAP的序列和结构进行初步鉴定，并确定其与m6A修饰形成和细胞信号调节等过程中的作用。

3.验证WTAP的功能和参与的生物学过程，进一步了解其在生物学中的作用。

结论：

WTAP是一种新的m6A甲基转移酶，目前尚未对其进行全面研究。本研究将从文库构建、蛋白质亲和纯化、质谱鉴定和功能验证等方面对WTAP进行研究，预期能够深入了解WTAP的序列和结构、功能以及参与的生物学过程。在此基础上，将为深入研究RNA修饰和其他生物学过程提供有益参考。