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ICS11.220
CCSB41
OB65
新疆
维吾尔自治区地方标准
DB65/T4504—2022
马血液梨形虫检测技术规程
Technicalregulationofhorsebloodpiroplasmadetection
2024-2-23发布2024-4-10实施
新疆维吾尔自治区市场监督管理局发布
I
DB65/T4504—2022
前言
本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由新疆农业大学提出。
本文件由新疆维吾尔自治区畜牧兽医局归口并组织实施。
本文件起草单位:新疆农业大学。
本文件主要起草人:张杨、宋瑞其、张伟、巴音查汗·盖力克、郭庆勇、张梦圆、王盼举、闻秀秀、李才善。
本文件实施应用中的疑问,请咨询新疆农业大学。
对本文件的修改意见建议,请反馈至新疆维吾尔自治区畜牧兽医局(乌鲁木齐市新华南路408号)、新疆农业大学(乌鲁木齐市农大东路311号)、新疆维吾尔自治区市场监督管理局(乌鲁木齐市新华南路167号)。
新疆维吾尔自治区畜牧畜牧兽医局联系电话:0991-8568089;传真:0991-8527722;邮编:830004新疆农业大学联系电话:0991-8763453;传真:0991-8763453;邮编:830052
新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话:0991-2818750;传真:0991-2311250;邮编:830004
1
DB65/T4504—2022
马血液梨形虫检测技术规程
1范围
本文件规定了马血液梨形虫病的术语和定义、PCR诊断的技术要求。
本文件适用于养马场(户)、动物诊疗机构和动物防疫防控机构对马梨形虫病的防治。
2规范性引用文件
本文件没有规范性引用文件。
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
马梨形虫病equinepiroplasmosis
由泰勒虫属的马泰勒虫(Theileriaequi)和巴贝斯属的驽巴贝斯虫(Babesiacaballi)寄生于马属动
物红细胞、淋巴细胞而引起的一类蜱传血液原虫病。
3.2
马泰勒虫theileriaequi
隶属于原生动物门(Protozoa)、顶复亚门(Apicocomplexa)梨形虫纲(Piroplasmea)、梨形虫目
(Piroplasmida)、泰勒科(Theileriidae)、泰勒属(Theileria)的马泰勒虫(Theileriaequi)。
3.3
驽巴贝斯虫babesiacaballi
隶属于原生动物门(Protozoa)、顶复亚门(Apicocomplexa)梨形虫纲(Piroplasmea)、梨形虫目(Piroplasmida)、巴贝斯科(Babesiida)、巴贝斯属(Babesia)的驽巴贝斯虫(Babesiacaballi)。
3.4
马泰勒虫生活史lifecycleoftheileriaequi
参见附录A。
3.5
驽巴贝斯虫生活史lifecycleofbabesiacaballi
参见附录B。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)
dNTPs:脱氧核苷酸三磷酸(deoxynucleotidetriphosphate)
Taq:水生栖热菌(Thermusaquaticus)
DNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid)DEPC:焦碳酸二乙酯(diethylpyrocarbonate)
2
DB65/T4504—2022
5诊断
5.1马泰勒虫病PCR诊断
5.1.1主要设备、耗材和试剂
高速离心机、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、4℃冰箱、-20℃冰箱、移液器(10μL,100μL,1000μL)、无菌采血管、无菌采血针、1.5mLEP管、吸头(10μL,100μL,1000μL)、PCR反应管、核酸提取试剂盒、PCR反应试剂、荧光核酸凝胶染色试剂、6×上样缓冲液(loadingbuffer)。
5.1.2样品采集、保存
进行颈静脉无菌采血。采集疑似马属动物无菌抗凝血约10mL,及时进行核酸提取。若采集的血液暂时无法进行核酸提取,可暂时放入-20℃冰箱短暂保存。
5.1.3样品DNA提取
宜使用核酸提取试剂盒
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