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《辣椒素合成酶活力的测定》编制说明

一、工作简况

(一)任务来源

辣椒素是辣椒中特有的一种生物碱类植物次生代谢产物,在食品、

保健、医药、农业和军事等领域都具有重要应用前景。辣椒素合成酶

(capsaicinsynthase,CS)催化辣椒素合成过程最后一步反应,即8-

甲基-6-壬烯基CoA与香兰素胺合成辣椒素,被认为是辣椒素合成调控

的关键酶。研究辣椒素合成酶活力与辣椒素含量的关系,可为丰富不

同辣椒类型的辣椒素合成酶的基因资源和通过基因工程方法调控辣

椒素含量打下基础。

对于辣椒素合成酶活力的测定,由于缺乏统一的标准,使得在进

行生化实验中难以确保实验数据的重复性、科学性和准确性。因此建

立辣椒素合成酶活力检测方法标准十分重要。研制辣椒素合成酶活力

的测定标准将为辣椒素合成酶的生产、流通及监管提供依据,促进我

国辣椒素合成酶相关的食品、保健、医药等工业的健康发展,具有非

常重要的现实意义。根据行业的现实需求,中国标准化研究院于2024

年3月提出《辣椒素合成酶活力的测定》团体标准计划,并牵头承担

标准起草任务。

2024年5月,经中国产学研合作促进会组织专家通过批准立项,

立项名称为《辣椒素合成酶活力的测定》。

(二)标准的起草单位及起草人

本标准起草单位:

本标准主要起草人:

(三)主要工作过程

1.预阶段

2024年3月至2024年5月标准起草单位组织相关技术人员对《辣椒

素合成酶活力的测定》标准项目进行了预研,对辣椒素合成酶的活力

测定条件进行了摸索,初步确立了辣椒素合成酶活力的测定方法。标

准起草组向中国产学研合作促进会提交了标准建议书与标准草案,进

行申报立项。

2.立项阶段

2024年5月,中国产学研合作促进会正式通过本团体标准的立项。

3.起草阶段

针对该标准项目,正式成立了标准起草工作小组,明确了任务要

求,安排了工作进度,根据单位参与的人员的专业、技能、人数将任

务合理分配。依据GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准

化文件的结构和起草规则》对标准草案进一步完善的同时,开展技术

指标的实验验证工作。

在此期间,通过线上和线下会议结合的形式开展了3次工作会议。

会议就标准制定的相关问题进行了协商与研究,并对标准的框架及内

容进行了认真研究和讨论。由此形成了最终的《辣椒素合成酶活力的

测定》团体标准征求意见稿和编制说明。

二、确定标准主要技术内容

(一)标准编制原则

坚持严要求、适宜性与可操作性相结合的原则。严要求即标准的

编制严格遵循GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分:标准化文

件的结构和起草规则》及相关法规的要求进行;适宜性既要充分考虑

到本行业的发展现状与特点,又要有一个适宜的范围与程度,从而提

高标准贯彻实施的可操作性。

(二)本标准主要技术内容

1.主体内容

本标准的主体内容包括:范围、规范性引用文件、术语和定义、

原理、试剂、仪器设备、试样制备和试验步骤、试验数据处理以及精

密度。

2.范围

本文件描述了测定辣椒素合成酶活力的方法。本文件适用于生化

试剂及科研试验中辣椒素合成酶活力的测定。

3.规范性引用文件

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。

GB/T21266辣椒及辣椒制品中辣椒素类物质测定及辣度表示

方法

4.术语和定义

对辣椒素合成酶活力单位进行了定义,是在37℃、pH6.8的条件

下,每小时生成1μmol辣椒素所需的酶量为一个酶活力单位,其单位

为U。

5.原理

辣椒素合成酶催化香兰素胺和8-甲基-6-壬烯酰CoA反应生成辣

椒素,通过高效液相色谱测定辣椒素的生成量,来计算酶活力。

6.试剂

本标准给出了辣椒素合成酶的测定方法中所使用的试剂的清单,

包括香兰素胺、乙酰CoA、ATP、8-甲基-6-壬烯酸、磷酸钾缓冲液、

盐酸溶液、氯仿、甲醇、辣椒素标准品,以及辣椒素合成酶的反应底

物溶液。描述了试剂的主要特性,并给出了溶液的制备方法。

由于酶活会受到反应底物浓度、pH以及温度的影响,在测定不同

反应底物浓度,不同pH以及不同温度

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