SNT 3536-2013 出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法.docxVIP

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准

SN/T3536—2013

出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法

DeterminationofAcidOrangeⅡinfoodsforexport

2013-03-01发布2013-09-16实施

中华人

中华人民共和国

SN/T3536—2013

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。

本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：魏国彬、蔡璇、李达。

SN/T3536—2013

出口食品中酸性橙Ⅱ号的检测方法

1范围

本标准规定了出口食品中酸性橙Ⅱ号的高效液相色谱测定方法。

本标准适用于饮料、红酒、辣椒酱、黄鱼和卤肉类食品中酸性橙Ⅱ号的检测。

2原理

样品经乙醇-氨溶液提取，用氨基阴离子交换固相萃取柱净化，反相高效液相色谱-二极管阵列检测

器进行色谱分析，采用外标法定量。

3试剂和材料

除非另有规定，仅使用分析纯试剂。

3.1甲醇：色谱纯。

3.22%甲酸水溶液：取2mL甲酸，用水定容至100mL。

3.310%氨水甲醇溶液：取10mL氨水，用甲醇定容至100mL。

3.4乙醇-氨溶液：取20mL氨水，加入20ml乙醇，用水定容至100mL,摇匀后备用。

3.50.02mol/L乙酸铵溶液：准确称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL,溶解，经0.45μm滤膜过滤。3.6氨基阴离子交换固相萃取柱：500mg;3mL,或相当者。使用前依次用3mL甲醇、3mL2%甲酸

水溶液活化。

3.7酸性橙Ⅱ号标准贮备液准确称取酸性橙Ⅱ号10.0mg(纯度≥95%),用水溶解后定容至100mL,配成

100pg/mL的标准贮备液。

3.8酸性橙Ⅱ号标准工作液：分别吸取适量标准贮备液用水依次稀释成浓度为0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.5Mg/mL、1.0ng/mL、10.0μg/mL的标准工作液，贮存子4℃冰箱中。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器(DAD)。

4.2分析天平：感量0.0001g和0.01g。

4.3超声波清洗器。

4.4离心机：转速不低于5000r/min。

4.5旋转蒸发仪。

4.6氮吹仪。

4.7固相萃取装置。

4.8涡旋混合器。

4.90.45μm水相滤膜。

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5试样制备与保存

将液体、浆状样品混合均匀，固体样品需磨细。贮藏在冰箱中的试样，应在试验前预先取出，并恒温至室温。

6样品处理

6.1提取

6.1.1液态试样

准确称取样品10g(精确至0.01g)(如含有乙醇需水浴加热除去乙醇后再用水定容至原体积)于

25mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，过0.45μm滤膜后，待测。

6.1.2固态试样

准确称取已粉碎样品2g(精确至0.01g),加乙醇-氨溶液(3.4)20mL,超声波提取30min,再振荡提取10min后，以不低于5000r/min的转速离心10min,重复提取一次，合并上清液，浓缩约至10mL,混匀后待净化。

6.1.3净化

将6.1.2中的待净化液转移至固相萃取柱(3.6)中。依次用3mL甲酸水溶液、3mL甲醇溶液淋洗，用6mL氨水甲醇溶液(3.3)洗脱。整个固相萃取过程流速控制在5mL/min之内。收集洗脱液，氮吹至近干，加水定容至2mL,涡旋混合1min,过0.45μm滤膜后，待测。

7测定

7.1液相色谱参考条件

液相色谱参考条件如下：

a)色谱柱：C?8柱，250mm×4.6mm,粒径为5μm或相当型号色谱柱；

b)流动相：甲醇：乙酸铵(0.02mol/L)=65:35;

c)检测波长：484nm;

d)流速：1mL/min;

e)进样体积：10μL;

f)柱温：室温。

7.2液相色谱测定

在上述色谱条件下，准确吸取标准工作液(3.8)及试液，在7.1色谱条件下分别进样，得到标准工作液和试液中酸性橙Ⅱ号的峰面积，外标法定量，同时做空白。酸性橙Ⅱ号标准物质典型色谱图参见附录A。

7.3平行试验

按照以上步骤对同一试样