液态枸杞产品中枸杞多糖的测定 离子色谱法.docx

液态枸杞产品中枸杞多糖的测定离子色谱法

1范围

本文件规定了液态枸杞产品如枸杞原浆、黑枸杞原浆、枸杞青汁中枸杞多糖含量的离子色谱测定方法。

本文件适用于液态枸杞产品如枸杞原浆、枸杞全浆、黑枸杞原浆、枸杞青汁中枸杞多糖水解后的单糖组成为半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸或单糖组成为以上各个单糖的任意组合的多糖含量的测定。

。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。3.1

枸杞多糖Lyciumbarbarumpolysaccharides

是一种以半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等为单糖单元的多糖，通过脱水缩合以糖苷键聚合而成的高分子化合物。

4原理

样品经乙醇除杂、水回流提取得到枸杞多糖后，用三氟乙酸消解，产物经阴离子色谱柱分离，经离子色谱仪测定，外标法定量，以各单糖的峰面积为基准计算出样品中枸杞多糖的含量。

5试剂与材料

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂，水为GB/T6682规定的一级水。

5.1试剂

5.1.1氢氧化钠（NaOH，CASNO.1310-73-2）：色谱纯。

5.1.2无水乙酸钠（CH3COONa，CASNO.127-09-3）：色谱纯。

5.1.3三氟乙酸（CF3COOH，CASNO.76-05-1）。

5.1.4无水乙醇（CH3CH2OH，CASNO.64-17-5）。

5.2溶液配制

5.2.1氢氧化钠（100mmol/L）和乙酸钠（150mmol/L）混合溶液：准确称量8.00g氢氧化钠（5.1.1）和24.60g无水乙酸钠（5.1.2）到预先加入约300mL水的500mL烧杯中，待完全溶解且温度降到室温后，转移至2000mL容量瓶中，再用预先脱气的水溶解定容。

5.2.2三氟乙酸溶液（2mol/L）：准确移取15mL三氟乙酸（5.1.3），加入到100mL容量瓶中，用水定容，混匀。

5.2.3乙醇溶液（80%）：将400mL无水乙醇（5.1.4）加入到500mL容量瓶中，用水定容，混匀。

5.2.4乙醇溶液（60%）：将300mL无水乙醇（5.1.4）加入到500mL容量瓶中，用水定容，混匀。

5.3标准品

标准品为经国家市场监督管理总局批准的标准物质或标准样品，见附录A表A.1。

5.4标准溶液配制

5.4.1单糖标准储备溶液：精密称取半乳糖，LD-阿拉伯糖，D-葡萄糖，L-鼠李糖，D-木糖，D-甘露糖，D-半乳糖醛酸，D-葡萄糖醛酸对照品16、38、26、10、26、4、100和4mg，分别置于20mL容量瓶中用水溶解并定容至刻度，混匀，4℃避光保存。

5.4.2混合单糖标准中间溶液：精密量取1mL各单糖标准储备溶液（5.4.1），加到10mL容量瓶中，用水稀释至刻度，混匀，4℃避光保存，有效期1个月。

5.4.3不同质量浓度的混合单糖标准系列工作溶液：分别移取混合单糖标准中间溶液（5.4.2）0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7mL至10mL容量瓶，用去离子水定容至刻度，混匀，配制成不同质量浓度的混合单糖标准系列工作溶液。

5.5材料

5.5.1反相净化小柱：RP前处理小柱，C18填料。

5.5.2水系膜，0.22μm。

6仪器

6.1离子色谱仪，配脉冲安培检测器（Au为工作电极，Pd为参比电极）。

6.2微波消解仪，配有聚四氟乙烯消解管。

6.3分析天平，感量0.000001g、感量0.00001g、感量0.01g。

6.4旋转蒸发仪/平行浓缩仪。

6.5涡旋混合器。

7样品

7.1试样制备

取市售枸杞原浆、枸杞全浆、黑枸杞原浆、枸杞青汁等液态枸杞产品摇匀备用。

7.2试样提取

精密称取样品5.0g（精确至0.01g），置入250mL圆底烧瓶中，加入150mL乙醇溶液（5.2.3），加热回流1h，趁热用布氏漏斗抽真空滤过，弃去滤液，滤渣与滤器用约50mL45℃~75℃热乙醇溶液（5.2.3）分5次过滤洗涤并弃去洗涤液；滤渣连同滤纸置烧瓶中，加150mL乙醇溶液（