GB∕T 40189-2021 牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定 高效液相色谱法.docxVIP

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Y43

中华人民共和国国家标准

GB/T40189—2021

牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定高效液相色谱法

Determinationofmetronidazoleandnorfloxacinintoothpaste—Highperformanceliquidchromatographymethod

2021-05-21发布2021-12-01实施

国家市场监督管理总局国家标准化管理委员会

发布

GB/T40189—2021

前言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由中国轻工业联合会提出。

本标准由全国口腔护理用品标准化技术委员会(SAC/TC492)归口。

本标准起草单位：江苏省产品质量监督检验研究院，江苏省理化测试中心，南京晓庄学院。

GB/T40189—2021

牙膏中甲硝唑和诺氟沙星的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了牙膏中禁用抗生素类药物甲硝唑和诺氟沙星含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法。

本标准适用于牙膏中禁用抗生素类药物甲硝唑和诺氟沙星含量的测定。本标准方法检出限为1mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

样品用提取液提取后，上清液经0.45μm滤膜过滤，用高效液相色谱-紫外检测法测定，保留时间定性，外标峰面积法定量。

4试剂和标准物质

除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

4.1提取液：0.1%(体积分数)甲酸水溶液：乙腈(95:5,体积比)。

4.2乙腈(流动相用):色谱纯。

4.3磷酸：分析纯。

4.4三乙胺：分析纯。

4.5甲硝唑标准储备液：称取0.1g(精确至0.0002g)甲硝唑标准品到100mL容量瓶中，加提取液定容至刻度线，甲硝唑质量浓度为1mg/mL,作为标准储备液备用。

4.6诺氟沙星标准储备液：称取0.1g(精确至0.0002g)诺氟沙星标准品到100mL容量瓶中，加提取液定容至刻度线，诺氟沙星质量浓度为1mg/mL,作为标准储备液备用。

4.7混合标准溶液：分别移取甲硝唑和诺氟沙星标准储备液各10mL至100mL容量瓶中，加提取液定容至刻度线。配制成质量浓度为100mg/L的甲硝唑、诺氟沙星混合标准溶液。经0.45μm滤膜过滤。

5仪器和设备

5.1高效液相色谱仪：配有二极管阵列检测器。

5.2分析天平：感量为0.0001g。

5.3pH计。

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GB/T40189—2021

5.4超声波清洗器。

5.5高速离心机。

5.6比色管：25mL。

6试样制备

牙膏样品挤弃约20mm后，准确称取5g样品(精确至0.0001g)至25mL比色管中，加入提取液(4.1)至刻度线，涡旋振荡2min,25℃以下水浴超声10min。静置后移取上清液10mL至10mL具塞离心管，4000r/min离心10min,0.45μm滤膜过滤待测。

7高效液相色谱测定

7.1液相色谱参考条件

液相色谱参考条件如下：

a)色谱柱：C??不锈钢柱(250mm×4.6mm×5μm)。

b)检测波长：290nm。

c)流动相：0.1%(体积分数)磷酸水溶液：乙腈(83:17,体积比)用三乙胺调节pH值到2.5～3.0。

d)流速：1.0mL/min。

e)柱温：30℃。

f)进样量：10μL。

7.2标准工作液制备

将100mg/L的混合标准储备溶液(4.7)用流动相液逐级稀释，配制成50mg/L、20mg/L、10mg/L、5mg/L的标准工作液。经0.45μm滤膜过滤备用。在设定色谱条件下，分别取10μL进行分析。以标准系列溶液的质量浓度为横坐标(mg/L)、对照品峰面积为纵坐标绘制校准曲线(线性相关系数R≥0.9990)。甲硝唑和诺氟沙星混合标准样品液相色谱图参见附录A中图A.1。

7.3测定步骤

样品按照第6章的步骤处理完成后按照7.1的仪器条件进行上机检测，样品待测液中甲硝唑和诺氟沙星的响应值应在标准曲线的线性范