酶工程考试重点整理.pdfVIP

第一章绪论：

酶学（Enzymology）是研究酶的性质、酶的作用规律、酶的结构和功能、酶的生物学

功能及酶的应用的科学。

酶工程(Enzymeengineering)又称酶技术,是酶制剂的大批量生产和应用的技术。是酶学、

微生物学的基本原理与化学工程有机结合而产生的交叉科学技术。

生物催化剂（改变生化反应的速率，不改变反应的平衡点和性质以及反应方向，本身

在反应前后也不发生变化的生物活性分子,外在因素），

酶:酶是一种高效、高度专一、和生命活动密切相关的、蛋白质性质的生物催化剂更高

(

的催化效率,更高的反应专一性,温和的反应条件,具有调节能力,本质是蛋白质;)

酶的本质（具有生物活性的蛋白质或RNA），

第二章酶的分类和命名

酶的分类（根据催化作用分为六大类:氧化还原酶类,转移酶类,水解酶类,裂合酶类,异构

酶类,合成酶类）

酶分子结构与功能：

①酶的蛋白质本质为酶的催化活性提供了多种功能性残基。

②酶的一级结构一方面为酶准备了功能片段，另一方面又为酶形成特定的活性构象奠

定基础。

③酶通过高级结构将相应的功能基团组织在酶分子的特定区域（如凹穴），形成活性中

心；活性中心指直接参与和底物结合并参与催化底物转化的各有关氨基酸按特定构象

分布组成的活性结构。

④活性中心的这种活性结构也要求活性中心以外的其他氨基酸残基共同维系；这些残

基被修饰、改变，或相互间连接被破坏，活性中心就会瓦解，酶失活。

活性中心（与催化作用直接相关的少数氨基酸残基组成的催化区域，具有严格保守性，

构象依赖于酶分子空间结构的完整性，活性中心各基团的相对位置得以维持，就可以

保证全酶的活力）结合部位(bindingsite)和催化部位(catalyticsite)。催化过程：酶和底

物的结合；催化底物进行转化。

酶分子是在一级结构基础上，通过二、三级的折叠盘绕，形成了具有催化功能的特定

活性构象结构域；酶分子是以这个活性构象结构域参与和底物结合，参与对底物进行

催化，这个结构域就是“活性中心”

第三章酶促反应动力学：

比活力specificactivity（每毫克蛋白里面所含有的酶活力单位数U/mg），

活力（又叫酶活力单位，一个标准单位：在特定条件下，如25摄氏度，pH和底物浓

度等其他条件都是最适条件时，一分钟能转化一微摩尔底物所需的酶量），

Km，米氏常数，在特定的反应条件下，是个特征常数，描述酶反应性质，反应条件对

酶反应速度的影响。1/Kmax表示酶对底物的亲和力，Km越大，亲和力越小。Km数

值相当于反应达到最大速度一半时的底物浓度。通过Km判断酶的最适底物，最适底

物有最大V/Km。

（1）酶反应的反应速度和底物浓度直接相关；

（2）底物浓度决定着酶系统的反应级别；

（3）衡量这种关系的尺度是Km；

米氏方程：v=Vmax×[S]/（Km+[S])，Vmax是酶被反应底物饱和时的反应速度，S为底

物浓度，Km为米氏常数，当底物浓度非常大时，反应速率接近一个恒定值，这个恒定

值即为Vmax。

酶促反应动力学的推导及其原理：

影响酶促反应速度的因素：酶浓度，温度，因为酶是蛋白质，pH，激活剂和抑制剂等

等。

可逆抑制（底物浓度对抑制程度的影响）：

①竞争性抑制作用：抑制剂（I）和底物（S）对酶（E）分子的结合有竞争作用，互相

排斥。E+I→EI，E+S→ES，Km增大，Vm不变。斜率变大。抑制程度随I浓度增

大而增大，随底物浓度增大而减小，高底物浓度可以减轻甚至消除I对E的影响。

有图。抑制剂结构上与底物相似，能结合到酶活性中心上，从而阻止底物与酶结合，

互相排斥。应用：药物设计。

②反竞争性抑制作用：抑制剂I只能和ES复合物结合成三元复合物，E和S的结合会

促进三元复合物的结合形成，但三元复合物ESI不能释放产物。Km，Vm随I增加

而减少，斜率Km/Vm不变。抑制程度随S和I增大而增大。

③非竞争性抑制：I结合E，也结合ES，但产生的ESI无催化活性，I实际上不改变E

对S的亲和力。Vm随I增大而减少，Km不变，斜率和纵轴截距随I增大而增大。

抑制程度随I增大而增大，与S无关，增加S的浓度不能消除I对E的抑制。