微生物学与免疫学课件药物检测.pptx

第18章微生物与药物变质第一节药物中微生物的来源1来自空气中的微生物2来自水中的微生物

3.其他来源原辅料操作人员：最大污染源设备容器及包装材料

第二节微生物引起的药物变质存在于药物中的微生物如遇到适宜的条件就能生长繁殖，使药物发生变化，这种变化可引起药物变质失效。药品成分营养丰富：葡萄糖注射液、糖浆、人参、血浆等。微生物代谢产物为原料，极易污染：金属离子促进微生物生长：pH值和渗透压：适合微生物生长。含水量

一、药物变质的判断1.有病原微生物存在2.微生物毒性代谢产物存在3.产品有可见的物理或化学变化4.微生物总数超标5.无菌制剂中有微生物的存在

二、药物变质的外在表现如：有异味；出现沉淀；pH改变；包装鼓胀等。三、药物变质的结果1.变质的药品引起感染2.药物理化性质的改变引起的药物失效3.药物中微生物产生有毒的代谢产物

四、影响药物变质的因素1.污染量2.营养因素3.含水量4.pH值5.储存温度

1.加强药品生产管理，实施GMP制度2.进行微生物学检验3.使用合适的防腐剂4.合理的包装材料和储存方法第三节防止微生物污染药物的措施

第19章药物的体外抗菌试验体外测定微生物对药物敏感程度的试验第一节常用的体外抑菌试验一、连续稀释法可用于测定MIC和MBC。MIC：能抑制测试菌生长的最低药物浓度MBC：能杀死测试菌生长的最低药物浓度

1.液体培养基连续稀释法

2.固体培养基连续稀释法84021Tetracycline(?g/ml)MIC=2?g/mlDeterminationofMICChlAmpEryStrTetDiskDiffusionTest

二、琼脂扩散法1.滤纸片法2.打孔法3.挖沟法

第二节杀菌试验一、最低杀菌浓度或最低致死浓度的测定MLC：药物杀死细菌的最低浓度。同MBC二、活菌计数法活菌计数法：在一定浓度的定量药物内加入定量的试验菌，作用一定时间后，取样进行活菌计数。从存活的微生物数计算出药物对微生物的致死率

三、石炭酸系数测定法在规定的实验条件下，作用一定的时间，将待测的化学消毒剂与石炭酸对伤寒沙门氏菌或金黄色葡萄球菌的杀菌效率相比较，所得杀菌效率的比值。

第三节联合抗菌试验联合抗菌试验主要用于测定两种抗菌药物联合应用时的相互影响。出现4种结果：协同：两种药物间，加强药物抗菌作用拮抗：两种药物间，减弱药物抗菌作用无关：两种药物间，相互之间无影响累加：两种药物间，作用为两者之和

联合药物敏感试验和杀菌试验意义目的在于：①治疗混合性感染；②预防或推迟细菌抗生素耐药性的发生；③联合用药可以减少剂量以避免达到毒性剂量；④联合用药比单一用药时效果更好。

一、纸条试验协同常用的方法无关

二、梯度平板纸条试验将琼脂培养基倒入平皿，平皿斜放凝固后制成斜面培养基。将平皿放平加入含抗菌药物的琼脂培养基，这样在制成的双层琼脂平板中含有梯度浓度的抗菌药物。要求其最小抑菌浓度的位置约处于平板的一半。然后将试验菌液均匀涂布在平板表面。取纸条浸透另一待检药液，按梯度中药物浓度递减的方向置于平板表面，培养后观察形成的抑菌区的图形以判断两种药物之间的相互作用。

+-协同作用

三、棋盘格法棋盘稀释法是常用的定量方法，首先分别测定拟联合的抗菌药物对检测菌的MIC。药物最高浓度为MIC的2倍，对倍稀释。两种药物的稀释分别在方阵的纵列和横列进行，这样在每管（孔）中可得到不同浓度组合的两种药物混合液。FIC（A）=联合用药时A药的MIC/A药单独试验时的MICFIC指数=FIC（A）+FIC（B）

FIC指数小于0.75为协同作用；1为相加作用；1～2为无关作用；＞2为拮抗作用。

棋盘法的设计

棋盘法的主要优点在于甲、乙两药的每个药物浓度都有单独的和与另一个药物不同浓度的联合，因此能精确测定两种抗菌药物在适当浓度的比例下所产生的相互作用。在进行棋盘法之前应先测定两种抗菌药物单独对受试菌的MIC，然后以两药MIC的8倍、4倍、2倍、1倍以及MIC的1/2、1/4、1/8浓度（或4倍、2倍、1倍、1/2、1/4浓度）分别进行联合。可见举例，如表—1的青霉素G与链霉素联合药敏实验和表2的TMP+SMZ的联合作用。

药物及浓