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多糖的提取和纯化

多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘要本文较

详细地介绍了多糖的提取和纯化方法，为多糖的研究和生产

提供参考依据。关键词多糖；提取；纯化；活性炭多糖

（polysacharides，PS），又称多聚糖，是由10个以上的单糖

通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合

物。它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和

真菌）与动物体内。20世纪60年代以来，人们逐渐发现多

糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能[1]：(1)多糖可作为

广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性

病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒[2]。

如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用[10]，黑木耳多

糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功

能[3-5]。(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降

血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。如柴胡多糖具有

抗辐射，增强免疫功能等生物学作用[6]，麦冬多糖具有降血

糖及免疫增强作用[7-8]，动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等

功能[9]。(3)多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与

衰老。如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用[10]，银杏外

种皮粗多糖具有抗衰老、抗过敏、降血脂、止咳祛痰、减肥

等功能[11]。另外，多糖作为药物，其毒性极小，因而多糖

的研究已引起人们极大的兴趣。由于多糖具有的生物活性

与其结构紧密相关，而多糖的结构又是相当复杂的，所以在

这一领域的研究相对缓慢。但人们在多糖的分离提取与纯化

方面已做出了不少工作。1.多糖的提取[12]热水浸提法：多

糖提取条件的优选根据文献报道[13]：影响热水浸提多糖的

因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH

值、醇析浓度和植物颗粒大小等。在试验前对上述多种因素

利用正交实验法做出优选，才能选出最佳提取方案。其步骤

为：原料→粉碎→脱脂→粗提（2－3次）→吸滤或离心→沉

淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。原料经粉碎后加入甲

醇、乙醚、乙醇、丙酮或1：1的乙醇乙醚混合液，水浴加

热搅拌或回流1－3小时，脱脂后过滤得到的残渣一般用水

作溶剂（也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1％醋酸

和1％苯酚或－1M氢氧化钠作为提取溶剂）提取多糖。温度

控制在90－100℃，搅拌4－6小时，反复提取2－3次。得

到的多糖提取液大多较粘稠，可进行吸滤。也可用离心法将

不溶性杂质除去，将滤液或上清液混合（得到的多糖若为碱

性则需要中和）。然后浓缩，再加入2－5倍低级醇（甲醇或

乙醇）沉淀多糖；也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六

烷基三甲基铵等，与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类

沉淀。然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤。将洗干后疏松的

多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中

减压干燥（若沉淀的多糖为胶状或具粘着性时，可直接冷冻

干燥）。干燥后可得粉末状的粗多糖。微波辅助提取法：其

原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度，使基

体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加

热，从而使萃取物质从基体或体系中分离出来，进入到介电

常数小，微波吸收能力较差的萃取剂中[14]。由于微波能极

大加速细胞壁的破裂，因而应用于中草药中有效成分的提取

能极大加快提取速度，增加提取产率。而且由于其选择性好，

提取后基体能保持良好的性状，提取液也较一般的提取方法

澄清[15]。聂金源等在柴胡多糖和黄酮化合物的提取[18]中对

微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较，发现

微波辅助提取法所需时间最短（10min），多糖的提取率最高

（％）。超声辅助法：其原理是利用超声波的空化作用加速

植物有效成分的浸出提取，另外超声波的次级效应，如机械

振动、乳化、扩散、击碎、化学效应等也能加速欲提取成分

的扩散释放并充分与溶剂混合，利于提取[16]。超声波辅助

法与常规提取法相比，具有提取时间短、产率高、无需加热

等优点[17]。索氏提取法：将植物粉末置于索氏提取器中，

加入石油醚，60℃-90℃条件下提取至无色（一般为6小时）。

过滤，滤渣挥发干燥完溶媒后加入80%乙醇，再提取6小时，

过滤，滤渣乙醇挥发干燥后加蒸馏水。回流提取2次，趁热

过滤，滤液减压浓缩，再除蛋白，醇沉，除色素。60℃干