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胆盐输出泵在胆道梗阻再通大鼠肝组织中的表达及意义
临床医学论文-胆盐输出泵在胆道梗阻再通大鼠肝组织中的表达及意义作者:
祝建勇别平陈应果冯春林唐春吴乔【摘要】目的探讨胆盐输出泵(BSEP)在胆道梗阻再通大鼠肝组织中的表达及意义。
方法将54只Wistar大鼠随机分为假手术(Sham)组、胆总管结扎(CBDL)组、胆道再通(BR)组,测定各时相点血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)以及肿瘤坏死因子(TNF)的水平,采用RTPCR方法和二步法免疫组化染色分别在基因转录、蛋白表达及肝细胞膜定位上检测BSEP在大鼠肝组织中的表达情况,运用Mias99病理图像分析系统半定量检测BSEP的平均积分光密度(IOD),与TBA和TNF作相关分析。
结果CBDL术后大鼠血清ALT,TBA及TNF显著增高(P0.05);BR术后上述指标逐步好转,7d时仍显著高于Sham组水平(P0.05)。
BSEPmRNA水平随着梗阻时间的延长明显降低(P0.05),CBDL术后14d仅微弱表达,梗阻解除后缓慢增高;BR术后7d仍未恢复至Sham组水平。
免疫组化染色显示BSEP表达定位于肝细胞膜上,变化规律与前述一致,并且与TBA和TNF呈显著负相关(r1=-0.9257,r2=-0.8536,P0.05)。
结论胆道梗阻再通大鼠模型中胆盐的代谢与BSEP水平密切相关,而TNF可能是影响BSEP变化的重要因素。
【关键词】胆盐输出泵肿瘤坏死因子胆道梗阻再通肝组织大鼠【Abstract】ObjectiveToexploretheroleofbilesaltexportpump(BSEP)inratliverwithbileductobstructionandbilereflow.MethodsFiftyfourmaleWistarratswererandomizedlydividedintothreegroups,shamgroup,commonbileductligation(CBDL)groupandbilereflow(BR)grouptodetectlevelofserumALT,totalbileacids(TBA)andtumornecrosisfactor(TNF)ateverytimepoint.ExpressionofBSEPatlevelofgenetranscription,proteinexpressionandhepaticcellmembranelocalizationwasmeasuredbyusingRTPCRandimmunohistochemistrymethod.MeanBSEPIODwasdetectedsemiquantitativelybyusingMias99pathologicalimageanalysissystem.Meanwhile,correlationofBSEPIODwithserumTBAandTNFwasperformed.ResultsAfterCBDL,levelsofserumALT,TBAandTNFwereascendedsignificantly(P0.05),whichgotagraduallyfavourableturnbutwasstillhigherthanthatinshamgroupsevendaysafterbilereflow(P0.05).TheexpressionofBSEPmRNAdecreasedasbileductobstructionelongated(P0.05),increasedslowly14daysafterCBDLandposteriortoobstructionreliefbutdidnotreachlevelofshamgroupsevendaysafter
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