- 1、本文档共5页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
精子属游离细胞,故较分散,不易行常规电镜
制样处理,且精液中含有较多的精浆成分,会影响
电镜观察,所以在精液透射电镜样品制备时,必须
对其进行特殊处理。
1材料和方法
取临床病人精液,约1ml左右,置清洁干燥的
盘尼西林小瓶中,放37?温箱约40min液化后,移
至离心管中,并加入约2倍于精液体积的019%生
理盐水或01067mol/L磷酸缓冲液,用吸管上下抽动将其混匀。然后采用低转速、短时间离心图1较完整精子,可见精子头、颈、尾部×10000
()1500r/min,5min。再弃上清。共重复3次离
心。
离心完毕后,将离心管中上清液弃去,加入
(311%戊二醛1,2mlpH712,714,01067mol/L
)()磷酸缓冲液配制,置冰箱4?,固定保存。固定
()2h后,用适当的工具可自制将离心团块轻轻挑
3取出来,规整修块成约1mm方块,然后将其移至
(标本瓶中,再用01067mol/L缓冲液pH712,
)714,加蔗糖清洗3遍,置4?过夜。以后步骤按1透射电镜常规制样技术操作。即经1%OO后固S4
定、乙醇或丙酮梯度脱水、Epon812包埋聚合、超图2精子头部,可见精子顶体及其内外膜及腔隙×20000薄切片、铀铅双染色,最后电镜观察。
之离心时转速较低,时间也较短,故人为损伤较小,2观察结果
()各种细胞器的保存较完好病理因素应排除在外。通过以上方法观察到的精子超微结构如图1,4图示可见精子顶体的内膜和外膜以及二者之间的腔所示。由于采用了近似生理环境的体外处理,加隙,轴丝的9组双管和中央的两条微管,以及大量
参考文献生的学习,改进讲课方法,认真备课以每一手术为1陈光华1联想推理法用于临床护理教学1护理学杂志,1出发点,应用联想推理法教导学生,使他们的()1996;11:56,57知识由薄?厚?薄,强调掌握基础知识的前提下,1997205205收稿]
强化实践操作。
电镜观察提供了多方面的观察之内容。
3讨论
以上结果证明,本方法制备的精子样品,在超
微结构保存上还是比较优越的,且操作也较简单可2靠,比琼脂预包埋等方法要方便。另外由于采
用了多次清洗离心将精浆去除,所以,样品观察中
其背景较干净,非常有利于观察分析。
在进行上述方法制备电镜样品时,有以下体会
?因精子对固定液的渗透压特别敏感,所以要严格控制固定液的及缓冲液的浓度和离子强度。?离心3精子细胞,周围可见精子各段的横断面×7500图时转速不宜过高,时间也不宜过长。?脱水包埋换
液时,要沿管壁缓缓的加入液,注意不要打散离心
团块。?离心次数不应少于3次,以防精浆成分去
除不充分而影响观察。?挑取及夹取样品团块时,
动作一定要轻柔、防止破碎。?因是人为离心成
块,故细胞间无天然联系且较散,所以在切片时,
块不宜修的过大,并要适当改变切速,刀角和厚
度。
参考文献应国华主编1医学生物学电镜技术与细胞超微结构1香1港:香港现代出版社,1993:30,55图4精子轴丝的9+2结构及中段的线粒体鞘×12000
洪涛主编1生物医学超微结构与电子显微镜技术1第22线粒体围绕外周致密纤维形成的螺旋排列的线粒体版,北京:中国科学院科学出版社,1984:124,126鞘都清晰可见。再者由于离心时是一种自然随机沉1997208220收稿]
降,所以精子的各部分各段基本上都可见
到,且有的呈横切面,有的呈纵切面,这样就为
胃癌术前X线内镜联合检查的评价
1212()李秀莲张伟山西省第二监狱医院内科临汾041000临汾市第二人民医院消化科
摘要胃镜和X线消化道造影联合检查,可提高确诊率和对早期胃癌的发现,为手术提供更可靠的依据。结果表明,28例
中早期胃癌2例,进展期26例,经手术病理证实,单纯X线检查漏诊3例,单纯胃镜检查漏诊1例,而两者
您可能关注的文档
- 纺织品的原料及种类.doc
- 纳米硅酸铝的制备方法及在涂料中的应用.doc
- 纯苯安全技术说明书.doc
- 纯化水质量标准及检验操作规程.doc
- 纤维水泥板成品库房钢结构厂房工程施工组织设计.doc
- 红色旅游策划书.doc
- 红大蒜种植实施方案.doc
- 红土镍矿在菲律宾的初步地质调查报告.doc
- 紫花苜蓿与玉米轮作生产技术规程.doc
- 索通发展股份有限公司新增除尘设施项目环评报告表.doc
- 英语人教PEP版八年级(上册)Unit4+writing+写作.pptx
- 人美版美术四年级(上册)8 笔的世界 课件 (1).pptx
- 人美版美术七年级(上册)龙的制作.pptx
- 英语人教PEP版六年级(上册)Unit 2 第一课时.pptx
- 数学苏教版三年级(上册)3.3 长方形和正方形周长的计算 苏教版(共12张PPT).pptx
- 音乐人教版八年级(上册)青春舞曲 课件2.pptx
- 音乐人教版四年级(上册) 第一单元 音乐知识 附点四分音符|人教版.pptx
- 英语人教PEP版四年级(上册)Unit 6 Part B let's learn 1.pptx
- 道德与法治人教版二年级(上册)课件-3.11大家排好队部编版(共18张PPT).pptx
- 人美版美术七年级(上册)《黄山天下奇》课件1.pptx
专注地铁、铁路、市政领域安全管理资料的定制、修改及润色,本人已有7年专业领域工作经验,可承接安全方案、安全培训、安全交底、贯标外审、公路一级达标审核及安全生产许可证延期资料编制等工作,欢迎大家咨询~
文档评论(0)