《mRNA疫苗及药物中dsRNA杂质定量检测-ELISA法》征求意见稿 编制说明.pdf

mRNAdsRNA-ELISA

《疫苗及药物中杂质定量检测法》

征求意见稿编制说明

一、工作简况

（一）任务来源

按照《中国食品药品企业质量安全促进会团体标准管理办法（试行）》的有

关规定和要求，由国家药品监督管理局疫苗及生物制品质量监测与评价重点实验

室、武汉瀚海新酶生物科技有限公司提出《mRNA疫苗及药物中dsRNA杂质定

-ELISA20244

量检测法》立项申请，中国食品药品企业质量安全促进会于年月

组织专家按程序审议后予以立项。

（二）目的、意义及必要性

mRNA新冠核酸疫苗的开发和成功应用，快速推动了mRNA技术在预防性

疫苗、治疗性疫苗和治疗性药物领域的广泛应用，mRNA与药物在疗效、研发

速度周期、成本价格、生产的可拓展性和安全性等方面具有显著优势。mRNA

疫苗的制备主要包括：前期研究确定抗原序列、质粒载体、扩增菌种、递送系统

等相关参数，mRNA疫苗的生产主要包括质粒DNA（plasmidDNA，pDNA）模

板的制备、mRNA原液的制备、mRNA的包封与灌装几个主要模块。其中，mRNA

原液的制备和转录是疫苗生产的关键步骤，mRNA的质量直接决定了疫苗的临

床表现。

在mRNA疫苗制备的体外合成过程中，T7RNA聚合酶可能以RNA或DNA

dsRNAdsRNA

（模板链与非模板链）为模板进行转录，形成不同类型的副产物。

是引发机体炎症反应的诱导剂之一，可通过抗原呈递细胞激活固有免疫反应，触

发信号通路的级联放大。外源dsRNA可被细胞中的Toll样受体（Tolllikereceptor，

TLR-IretinoicacidinduciblegeneI,RIG-I

）、维甲酸诱导基因（）和黑色素瘤分化

相关蛋白5（melanomadifferentiationassociatedprotein5，MDA5）识别而激活信

[]:

号通路，释放TNF-α和IFN-y等细胞因子，导致炎症反应的发生。此外，dsRNA删除叶宇翔8

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/

所表现出的免疫原性，一方面会因为自身免疫系统与翻译系统间的反馈调节而降

低mRNA的翻译效率；另一方面，dsRNA使机体形成记忆免疫，当mRNA药物

需要重复给药时，会造成药物效力降低。因此，为监测和控制疫苗中主要杂质的

残留量，保证疫苗及药物的安全性，需要在mRNA疫苗药物的生产过程中严格

控制dsRNA的含量，这就要求生产厂商能对dsRNA进行精确定量检测。

20208mRNA

年月，国家药监局药审中心发布《新型冠状病毒预防用疫苗

药学研究技术指导原则（试行）》，2022年5月国家药监局药审中心发布《体

内基因治疗产品药学研究与评价技术指导原则（试行）》。美国药典（USP）分

20222420248Analytical

别于年月、月和年月发布第一版、第二版和第三版《

ProceduresformRNAVaccineQuality（DraftGuidelines）》。2022年4月，WHO

发布《evalu