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【独家】细说循环肿瘤细胞的前世今生

导读

近几年循环肿瘤细胞(circulatingtumor

cells,CTCs)在肿瘤诊断、治疗和监控等方面

的临床表现逐渐崭露头角，是目前最具发展潜

力的肿瘤无创诊断和实时疗效监测手段。

循环肿瘤细胞(circulatingtumorcells,CTCs)是指自发或因诊疗

操作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞,是恶性肿瘤患

者出现术后复发和远处转移的重要原因，也是导致肿瘤患者死亡的重

要因素。近几年CTCs在肿瘤诊断、治疗和监控等方面的临床表现逐渐

崭露头角，是目前最具发展潜力的肿瘤无创诊断和实时疗效监测手段，

临床应用价值极其显著。与传统的影像学诊断、内窥镜检查以及病理

学诊断相比，优势显著，可更加敏感地发现疾病的变化，更加科学、

迅速的评价某一治疗方案的效果。而且分离富集CTCs只需抽取患者少

量外周血，对患者没有副作用，因此可以高频度的监测，达到实时监

测疾病进展的目的。更为重要的是，CTCs可作为分析患者肿瘤生物学

特征的实时样本，可以发现患者的实时生物学变化，并根据结果及时

调整治疗方案，实现实时的个体化治疗。

早在1889年，Paget提出了“种子和土壤”的学说，强调癌细

胞和微环境之间的关系，认为肿瘤转移的形成，是处于旺盛生长状态

的肿瘤细胞作为“种子”，当遇到合适的器官、组织的基质环境，即

“土壤”时，就会发生肿瘤的转移。在1896年，澳大利亚学者

Ashworth在一例转移性肿瘤患者血液中首次观察到从实体肿瘤中脱离

并进入血液循环的肿瘤细胞，并率先提出了CTCs的概念。不过长时间

以来CTCs的检测并未在肿瘤病人的防治中发挥应有的作用,主要原因

就是检测技术未取得突破性进展。从上世纪末以来CTCs检测技术得到

了不断的改进，随之带来的是CTCs检测在临床的应用。FDA于2004

年批准了Cellsearch系统在转移性结直肠癌、乳腺癌和前列腺癌治疗

中的应用，随着CTCs研究的不断深入，越来越多的肿瘤治疗会得益于

CTCs的检测。

随着CTCs的临床应用价值凸显，近几年，国内外许多研究机构和

厂家都在推出不同的CTCs检测技术。

总结起来，CTC技术主要分为以下几种：

1以CTCs表面抗原和免疫荧光为基础的方法

市场上已有多种应用这种原理的检测设备，如CellSearch系统、

CTC-Chip、免疫磁性细胞分选仪(MACS)、RARECell、AdnaTest癌

细胞检测系统等。以CellSearch系统为例，CellSearch系统是目前惟

一被FDA批准进入临床，用于预测转移性乳腺癌、前列腺癌和结直肠

癌的CTCs检测技术，这种技术集合了免疫磁珠分选技术和免疫细胞化

学法的分离检测技术。其主要原理是利用偶联了EpCAM（上皮细胞粘

附因子）抗体的磁颗粒与肿瘤细胞表面的抗原相结合，然后结合荧光

染料的抗-CD45和抗细胞角蛋白(CK8/18/19)，最后采用DAPI染色来

鉴定细胞核，EpCAM（）CK（）DAPI（）CD45（-）的细胞被界

定为CTC并进行计数。然而事实上，各种不同组织来源的肿瘤细胞只

有70％表达EpCAM，一些肿瘤细胞由于发生了上皮间质转化（EMT)，

上皮细胞特异性抗原丢失使得单一抗体捕获CTCs的效率降低。

2以细胞大小差异和过滤为基础的方法（ISET）

这种方法是基于CTCs与大部分血细胞存在明显的尺寸差别以及

CTCs较正常血细胞不容易变形。研究表明运用8微米的虑孔分离CTCs

效果最佳。富集到的CTCs可再通