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肠道原虫检查方法
;常见的肠道原虫主要种类;一、检查方法
常用的有生理盐水直接涂片、碘液染色和铁苏木素染色、三色酸染色法、固定染色、抗酸染色法及培养法等。
(一)实验器材
显微镜(10×40)、显微镜测微尺、玻片、盖玻片、竹签、记号笔等。
;(二)实验试剂
1、0.85%盐水
NaCl0.85g蒸馏水加至100ml
2、卢戈氏碘液
碘化钾6.0g,碘4.0g蒸馏水至100ml
(先用30ml左右蒸馏水溶解碘化钾,再加入碘混匀溶解后加蒸馏水至100ml,充分混匀后储存于棕色瓶中)
;(三)操作步
直接涂片法(用于滋养体检测)
标本采集自然排出、无尿液掺混的新鲜粪便(注意保温);
取预温洁净载物玻片一张,加滴37℃预温的生理盐水1滴~2滴;
在保温条件下,用竹签挑取粪便标本可疑部分(如有粘液、血液应尽可能采取粘液、血液部分),在盐水中涂抹成直径为1cm粪便薄膜,厚度以透过粪便薄膜能看清字为宜;
盖上盖玻片,置显微镜下观察有无活动的滋养体.;碘液玻片法(用于包囊检测)
涂片时用碘液代替生理盐水,制法及注意事项同直接涂片法;
盖上盖玻片,显微镜下观察包囊。
注意事项
涂片的厚度以看清报纸上的字迹为度,太薄易漏查,太厚难以观察;
因为虫体大小在鉴定上是重要的依据,因此显微镜必须装备有目镜测微器。;二、病原形态鉴别
原虫是由单一细胞构成,属于单细胞真核动物,它所有的生命活动都是在细胞内完成的。
(一)基本结构
主要有表膜、细胞质和细胞核
1、表膜:包在虫体表面,可保持虫体的完整性,并参与虫体摄食、排泄、感觉、运动等生理活动,具有很强的抗原性。
;2、细胞质:多数原虫分内质与外质两部分
(1)内质:呈细颗粒状,占细胞质的大部分,内含细胞核、食物泡、伸缩泡等。
(2)外质:分布在虫体表层,透明或有微细颗粒,运动细胞器是由外质形成。
伪足:是肉足亚门原虫所特有的临时性运动器,为外质的暂时性突出部分,常见为叶状,偶可见树根状或网状。
鞭毛:是鞭毛虫纲原虫的运动细胞器官,???外质底下的毛基体发出的细胞质丝状延伸部分,鞭毛数目因虫种而异。
纤毛:是纤毛虫纲原虫的运动细胞器,结构与鞭毛基本相似,也是从基体发出,但数量多,短而尖细。
波动膜:是毛滴虫的运动细胞器。
;3、细胞核
细胞核在内质中,与原虫的生长、繁殖有关,是原虫分类鉴别的重要依据。分两种类型:
泡状核:圆、椭圆或相类似型状。核染色质颗粒量少,分布不均,在碱性染料下着色很浅,呈现为泡状核。阿米巴、鞭毛虫及纤毛虫的小核均属此型。
实质核:形状多样,常见有椭圆形、肾形或马蹄形,核染色质颗粒量多。纤毛虫的大核属此型。;
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;(二)鉴别要点
1、大小:最小直径仅2μm,大可达200μm;2、运动
运动形式—伪足、鞭毛、纤毛
运动速度—活泼或缓慢
运动方向—定向或不定向
3、细胞核
核数量、形状、位置
核膜厚、薄
核仁大小、形状、位置
4、细胞质
滋养体——界细胞质线是否明显,颗粒细密或粗大;浆内有无吞噬的红细胞。
包囊——囊壁厚、薄,折光度,细胞质有无纤丝状排列、糖元块和拟染色体。
;;;19;20;21;;;;25;;;;;
;;布氏嗜碘阿米巴包囊;;;寄生人体肠道的阿米巴滋养体鉴别特征;寄生人体肠道的阿米巴包囊鉴别特征(碘染色);5、蓝氏贾第鞭毛虫;5、蓝氏贾第鞭毛虫;39;;;;包囊;44;7.人芽囊原虫
人芽囊原虫广泛分布于世界各地。该虫是寄生在高等灵长类和人类肠道内可致病的原虫。人芽囊原虫可侵入肠粘膜上皮。临床表现轻重不一,带虫者可高达44.12%。感染重者可有消化道症状,如腹泻、腹胀、厌食、恶心、呕吐,甚至出现发烧寒战等。免疫功能正常的患者多数为自限性。艾滋病患者容易感染人芽囊原虫,而且症状严重,治疗十分困难。预防应加强卫生宣传教育,注意个人卫生和饮食卫生;粪便无害化处理,保护水源,杀灭传播媒介昆虫;轻微症状者无需治疗,当大量寄生或出现
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