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实验一检测生物组织中的糖类、

脂肪和蛋白质--（二）

一．实验目的：

尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理—颜色反应，识记

和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握鉴定上述

化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。

二．实验原理：

某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。

1．生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的

分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非

还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶

性非还原糖。

可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2O

沉淀。如：

葡萄糖+2Cu2++4OH—加热葡萄糖酸+Cu2O↓（砖红色）+H2O

即Cu2+被还原成Cu2O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色沉淀

淀粉遇碘变蓝色（直链）或紫（红）色（支链）。

2．脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不

溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或

与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。

脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。

在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂

类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏丹黑及油红O等。

脂肪被染色，实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中

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脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度

（37℃-60℃）对组织切片染色效果是有好处的。

脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶

等。

脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色），胆脂素呈

淡红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。

苏丹Ⅲ染色液染色：脂肪呈橙红，胞核呈兰色

3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性

NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。）

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三．实验材料

1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为

组织的颜色较浅，易于观察。）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色

甘蓝叶、白萝卜。

2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4

小时（也可用蓖麻种子）。

3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。

4．淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。

四、实验试剂