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高效液相色谱法

High-PerformanceLiquidChromatography，HPLC

70年代迅速发展不挥发有机物约占70%80年代以来HPLC文献量21%（89年）仪器销售量25%（12亿）（89年）应用领域拓展（化工、环保、临床、药品、生命）超过GC

21-1高效液相色谱仪1、仪器结构

21-1高效液相色谱仪1、仪器结构

21-1高效液相色谱仪

1、仪器结构

21-1高效液相色谱仪

1、仪器结构

HPLC与GC比较a.柱长:10—50cm内径:2—5mm微柱◎填充柱微HPLC柱0.5~1.0mm毛细管HPLC柱100~500μm纳级HPLC柱10~100μm◎拉制HPLC柱50~200μm◎开管HPLC柱5~10μm21-1高效液相色谱仪

2、掌握要点

微柱的优越性：1、消耗少（样、流动相、固定相）2、灵敏（溶质在柱上稀释比下降）3、分离效率高（可装长柱）4、操作条件易选择5、其它分离联用易21-1高效液相色谱仪

2、掌握要点

b、检测系统常用UV光度检测（包括它的现代方法）21-1高效液相色谱仪

2、掌握要点

21-1高效液相色谱仪

2、掌握要点b、检测系统光度阵列检测

b、检测系统引人注目：荧光检测选择性10-9~10-11g/ml质谱检测通用性10-8g/ml蛋白质分析生物质谱21-1高效液相色谱仪

2、掌握要点

C、梯度林洗装置作用：让流动相的组成随时间而改变，以调节流动相的极性、离子强度或pH，使样品组分的相对保留值得以改变，从而提高分离效率。与GC的程序升温技术比较21-1高效液相色谱仪

2、掌握要点

1、固定相分类材料性质形状2、流动相选择溶剂要求

21－2固定相和流动相

1分配色谱（LLC）2吸附色谱（LSC）3键合相色谱4离子交换色谱5离子对色谱6凝胶渗透色谱分离原理分离类型选择正相色谱与反相色谱的概念