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CrisprCas9技术敲除鮰爱德华氏菌致病蛋白

摘要

鮰爱德华氏菌是斑点叉尾鮰鮰肠败血症的主要致病菌，历年给养殖业造成了巨大的损失。在已有防治手段中，免疫疗法是有希望能够高效地对该疾病进行预防的重要途径。有研究表明环磷酸腺苷(cAMP)受体蛋白(CRP)基因是细菌各类毒性因子的总调节器，Crp基因的缺失可以减弱病原菌的毒性。

本实验旨在使用CrisprCas9系统定向敲除鮰爱德华氏菌中Crp基因的部分片段，以达到在目的菌株中缺失该蛋白表达的目的。实验利用在线网站设计出对应鮰爱德华氏菌Crp基因的gRNA，并通过同源臂重叠PCR获得修复模板，构建出了重组质粒sgRN