贵州竹乡乌骨鸡Ghrelin基因的克隆、表达及生理活性的研究.pdfVIP

贵州竹乡乌骨鸡Ghrelin基因的克隆、表达及生理活

性的研究

摘要：本文利用PCR和克隆技术克隆了贵州竹乡乌骨鸡的Ghrelin

基因，并在大肠杆菌中表达。通过Westernblot和酶联免疫吸附试验

（ELISA）对重组蛋白进行鉴定。结果表明，表达出的重组Ghrelin蛋白

具有生物学活性，与内源性Ghrelin相似。这项研究为更深入地了解贵州

竹乡乌骨鸡的生理机制提供了新的资料。

关键词：贵州竹乡乌骨鸡；Ghrelin；基因克隆；表达；生物学活性

引言：Ghrelin是一种由胃部细胞产生的肽激素，可以促进食欲和能

量摄入，并对脂肪代谢、胰岛素分泌和胃肠运动等生理过程产生影响。

在家禽中，Ghrelin的作用也得到了越来越多的关注。然而，目前国内还

缺乏对Ghrelin基因克隆、表达及其生理活性的研究。因此，本文旨在对

贵州竹乡乌骨鸡的Ghrelin基因进行克隆、表达和生物学活性的研究。

材料与方法：从贵州竹乡乌骨鸡胃组织中提取总RNA，利用RT-PCR

技术扩增Ghrelin基因全长。将PCR产物克隆到已经线性化的pGEX-6p-1

载体中，用大肠杆菌进行转化和表达，利用GST-tag对重组蛋白进行纯

化。Westernblot和ELISA进行鉴定，以确定重组Ghrelin蛋白的生物学

活性。

结果：通过PCR扩增，获得了贵州竹乡乌骨鸡的Ghrelin基因全长，

长度为318bp。在大肠杆菌中进行了表达和纯化，并用于生物学活性的

鉴定。Westernblot和ELISA结果表明，表达出的重组Ghrelin蛋白具有

生物学活性，与内源性Ghrelin相似。

讨论：Ghrelin在家禽中的作用一直备受关注，因为它会影响家禽的

能量代谢、食欲调控和肌肉生成。本研究成功克隆了贵州竹乡乌骨鸡的

Ghrelin基因，并在大肠杆菌中表达出重组蛋白。通过ELISA和Western

blot的鉴定，证明表达出的重组Ghrelin蛋白具有活性，可用于后续实验

研究。

结论：通过本研究，我们成功克隆了贵州竹乡乌骨鸡的Ghrelin基因，

并表达出重组蛋白。重组Ghrelin蛋白具有生物学活性，可用于进一步研

究贵州竹乡乌骨鸡的生理机制。这项研究结果为了解家禽生物学机制提

供了新的资料。

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