RNA的生物合成课件.pptVIP

（一）轉錄起始轉錄起始需解決兩個問題：RNA聚合酶必須準確地結合在轉錄範本的起始區域。DNA雙鏈解開，使其中的一條鏈作為轉錄的範本。一、原核生物的轉錄過程2.DNA雙鏈解開1.RNA聚合酶全酶(?2????)與範本結合RNApol(?2????)-DNA-pppGpN-OH3?轉錄起始複合物:3.在RNA聚合酶作用下發生第一次聚合反應，形成轉錄起始複合物5?-pppG-OH+NTP?5?-pppGpN-OH3?+ppi轉錄起始過程（二）轉錄延長1.?亞基脫落，RNA–pol聚合酶核心酶變構，與範本結合鬆弛，沿著DNA範本前移；2.在核心酶作用下，NTP不斷聚合，RNA鏈不斷延長。(NMP)n+NTP??(NMP)n+1+PPi轉錄空泡(transcriptionbubble)：RNA-pol（核心酶）····DNA····RNA5?3?DNA原核生物轉錄過程中的羽毛狀現象核糖體RNARNA聚合酶依賴Rho(ρ)因數的轉錄終止非依賴Rho因數的轉錄終止（三）轉錄終止指RNA聚合酶在DNA範本上停頓下來不再前進，轉錄產物RNA鏈從轉錄複合物上脫落下來。分類ATP1.依賴Rho因數的轉錄終止Rho因數對RNA上的polyC結合能力強Rho因數有ATP酶活性和解螺旋酶活性與RNA轉錄產物結合，使得Rho因數和RNA聚合酶都可發生構象變化，從而使RNA聚合酶停頓，解螺旋酶活性使得DNA/RNA雜化雙鏈拆離，利於產物從轉錄複合物中釋放Rho因數轉錄終止的作用：2.非依賴Rho因數的轉錄終止DNA範本上靠近終止處，有些特殊的堿基序列，轉錄出RNA後，RNA產物形成特殊的結構來終止轉錄。5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`RNA5?TTGCAGCCTGACAAATCAGGCTGATGGCTGGTGACTTTTTAGTCACCAGCCTTTTT...3?DNAUUUU...…UUUU...…5`UUGCAGCCUGACAAAUCAGGCUGAUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUUUUU...3`莖環(stem-loop)/髮夾(hairpin)結構使RNA聚合酶變構，轉錄停頓；DNA和RNA各自形成自己的局部雙鏈，使雜化鏈更加不穩定，以致轉錄複合物趨於解體。接著的一串寡聚U，則更是促進RNA新鏈從範本上脫落的促進因素。5′pppG5?3?3?5?RNA-pol莖環結構使轉錄終止的機理二、真核生物的轉錄起始（一）轉錄起始真核生物的轉錄起始上游區段比原核生物多樣化，轉錄起始時，RNA-pol不直接結合範本，其起始過程比原核生物複雜。轉錄起始點TATA盒CAAT盒GC盒增強子順式作用元件(cis-actingelement)1.轉錄起始前的上游區段AATAAA切離加尾轉錄終止點修飾點外顯子翻譯起始點內含子OCT-1OCT-1：ATTTGCAT八聚體2.轉錄因數能直接、間接辨認和結合轉錄上游區段DNA的蛋白質，現已發現數百種，統稱為反式作用因數(trans-actingfactors)。反式作用因數中，直接或間接結合RNA聚合酶的，則稱為轉錄因數(transcriptionalfactors,TF)。參與RNA-polⅡ轉錄的TFⅡ3.轉錄起始前複合物(pre-initiationcomplex,PIC)真核生物RNA-pol不與DNA分子直接結合，而需依靠眾多的轉錄因數。POL-ⅡTFⅡFⅡAⅡB由RNA-PolⅡ催化轉錄的PICPOL-ⅡTFⅡFⅡHⅡETBPTAFTFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA複合物TATAⅡAⅡBTBPTAFTATAⅡHⅡECTD-PPIC組裝完成，TFⅡH使CTD磷酸化4.拼板理論(piecingtheory)一個真核生物基因的轉錄需要3至5個轉錄因數。轉錄因數之間互相結合，生成有活性，有專一性的複合物，再與RNA聚合酶搭配而有針對性地結合、轉錄相應的基因。（二）轉錄延長真核生物轉錄延長過程與原核生物大致相似，但因有核膜相隔，沒有轉錄與翻譯同步的現象。RNA-pol