TSHAAV 016-2024 猫呼吸道病原检测 微流控芯片法.docxVIP

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T/SHAAV016—2024

附录C(资料性)

微流控芯片的制作

C.1引物工作液的配制

将附录B中各引物配制成浓度为100μmol/L的储存液，分别吸取引物F3、B3、FIP、BIP、LF(LB)

储存液各10μL、10μL、80μL、80μL、10μL于离心管中混合，再加入0.89mLDEPC水，涡旋混匀，

500r/min离心30s,即作为引物工作液。

C.2引物包埋

采用微量点样仪，将各个引物均匀的点布在微流控芯片上的特定位置区域，每反应孔添加引物工作液2μL,芯片反应孔和加样孔的布局示意图如图C.1。将加好引物工作液的芯片置于37℃恒温干燥箱干燥30min,确保彻底干燥后贴上封口膜密封芯片。

图C.1猫呼吸道病原联检微流控芯片布局示意图

说明：

A1、B1苗流感病毒检测孔：C1猫流感病毒阳性对照孔：D1猫流感病毒阴性对照孔；A2、B2—猫嵌杯病毒检测孔：C2猫嵌杯病毒阳性对照孔：D猫嵌杯病毒阴性对照孔；

A3、B3——猫疱疹病毒1型检测孔：C猫疱疹病毒1型阳性对照孔；D3——猫疱疹病毒1型阴性对照孔；A4、B4衣原体检测孔：C4—衣原体阳性对照孔：D4—衣原体阴性对照孔：

A5、B5支原体检测孔：C5支原体阳性对照孔：D5支原体阴性对照孔；

A6、B6——支气管败血波氏杆菌检测孔；C6——支气管败血波氏杆菌阳性对照孔；D6——支气管败血波氏杆菌阴性对照孔；

A7、B7、C7、D7——空白对照孔；A8、B8、C8、D8——内参对照孔。