两面针组培苗规模化生产技术.docx

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两面针组培苗规模化生产技术

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时群陈丽文杨利平

摘要??为优化两面针组培育苗流程、改善生产工艺，本文总结了一套两面针组培苗规模化生产技术，包括母株培养、培养基准备、外植体采集及处理、无菌芽诱导、继代增殖培养、生根培养、炼苗、移栽、施肥及管护、病虫害防治、苗木出圃、安全措施、档案管理、存在的问题及解决措施等方面内容，以期为两面针组培苗生产提供参考。

关键词??两面针;组培苗;规模化生产;组织培养

中图分类号??S567.19????文献标识码??B

文章编号?1007-5739（2020）15-0090-02??????????????????????????????????????????開放科学（资源服务）标识码（OSID）

两面针（Zanthoxylumnitidum（Roxb.）DC.）为芸香科花椒属植物，是广西的道地中药材品种，药用部位为根，具有行气止痛、活血化瘀、祛风通络等功效，是制作保健牙膏和中成药的主要中药材品种[1-3]，用途广泛，经济效益较好，目前引种繁殖栽培的有2个类型[4]。钦州市林业科学研究所经过多年摸索，在组培育苗研究[5-8]的基础上，优化总结出一套有效生产两面针组培苗的技术流程。

1??母株培养

选择生长旺盛、无病虫害的优良两面针种质材料种植在大棚中作母株，育苗容器选用规格为16cm×16cm以上的大塑料营养袋，基质选用黄心土∶泥炭土∶细河沙=7∶2∶1制成的营养土，于离地面茎高15～30cm处截断，使其萌发新梢，散射光下继续培育成半木质化枝条。

2??培养基准备

一是芽诱导培养基，配方为MS培养基+6-BA0.4mg/L+IBA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3.5g/L（J1）;二是芽继代增殖培养基，配方为改良MS培养基+6-BA0.6～0.8mg/L+IBA0.3～0.4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3.5g/L（J2）或改良H+6-BA0.6～0.8mg/L+NAA0.3～0.4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3.5g/L（J3）;三是生根培养基，配方为1/2MS+ABT60.6～0.8mg/L+NAA0.3～0.4mg/L+蔗糖15g/L+琼脂3.2g/L（J4）或1/10MS+NAA0.5～0.7mg/L+蔗糖15g/L+琼脂3.2g/L（J5）。以上培养基均调至pH值5.6～6.0，分装于广口瓶中，按常规高压灭菌，冷却，备用。改良MS培养基和改良H培养基的FeSO4·7H2O用量分别是MS和H培养基用量的1.5倍。

3??外植体采集及处理

春季、夏季和秋季，连续晴天3d以上，于9：00—12：00、15：00—17：00，采集母株上当年萌发的长20～30cm、无病虫害、生长旺盛的半木质化嫩枝条作为外植体材料;剪掉枝条上的叶片，用洗洁精清洗后，再用自来水冲洗干净;剪成约5cm长、带2～3个腋芽的茎段，用冷开水浸泡30min，在超净工作台上将茎段用0.1%HgCl2溶液消毒6min，无菌水冲洗3次，再用0.1%HgCl2溶液消毒6min，无菌水冲洗5次。

4??无菌芽诱导

将消毒好的外植体，在无菌条件下剪成2～4cm长的茎段或茎尖，垂直或略倾斜接种于芽诱导培养基J1中，放置在培养室用黑布遮盖进行暗培养，培养温度（25±2）℃，相对湿度60%～80%。培养至腋芽开始萌出后掀开黑布，先在100～500lx弱光下培养7d后，再置于500～5000lx散射光下继续培养，至不定芽长约2cm。

5??芽继代增殖培养

待诱导出的腋芽长成1.5～3.0cm高的丛芽，将丛芽剪切分成2～3个芽的丛芽或单芽，垂直或略倾斜接种到芽继代增殖培养基（J2或J3）上，每个200mL广口瓶接种丛芽4～5丛。接种后，先在光照强度400～800lx的弱光下培养10～15d，再置于光照强度2000～4000lx条件下培养，每天光照时间8～12h，以自然散射光为主、人工光照为辅。培养温度（25±2）℃，相对湿度60%～80%。继代培养周期25～30d，继代次数不大于36代。

6??生根培养

剪取无污染、顶芽明显、芽高3cm以上、健壮、叶片绿色的单芽苗转接到生根培养基（J4或J5）上，每个200mL广口瓶接种10株，在400～800lx弱光条件下培养，每天光照时间为10～12h。培养15d左右，长出幼根。

7??炼苗

生根苗根系长1～2cm时，移至遮光70%～80%的大棚内自然光下炼苗，先放在光线稍弱的培养架下层炼苗5～7d，再放到光线