生物综合项目工程下游关键技术练习题及答案.pdfVIP

练习题及答案

填空题

1.超声波破碎细胞效率与声频、声能、解决时间、细胞浓度及细胞类型等因素关于。

3在生物工程下游技术领域，色谱和电泳是当前所知最佳两种分离蛋白办法。

5无论是什么类型液相或气相色谱,其色谱装置均应涉及：流动相供应、进样、色谱柱、检测

器等四大某些。

7径向色谱填料重要有：离子互换树脂和亲和色谱填料两种。

9请列举任意四种破碎细胞办法：

高压匀浆法，高速珠磨法，超声破碎，酶溶法。

11请列举二种测量蛋白质含量办法：双缩脲法，考马斯蓝法。

13无机HPLC填料最常用是以多孔大硅胶为基本材料填料；含14硼Na2O-B2O3-SiO2系玻璃

通过热解决引起相分离，生成可溶于酸相及不溶于酸高硅相。将酸可溶

相浸析出来后剩余另一相就制成了可控孔径玻璃，可控孔径玻璃重要化学成分就是SiO2。

(每空1分)

17羟基磷灰石在原理上普通被以为是一种无机基质高效色谱。

19．指出蛋白质复性三种办法：稀释法，透析法，液色色谱法等

21．膜孔径普通为微米级，根据其孔径不同（或称为截留分子量），可将膜分为微滤膜、超

滤膜、纳滤膜和反渗入膜

23．色谱峰宽可以用半峰宽、峰底宽、原则偏差表达。

26．ShepadexG25是一种凝胶排阻色谱，重要用于脱盐。

32．当前径向色谱柱使用填料重要有离子互换树脂和亲和色谱两种;

34．细胞破碎法涉及：机械力和非机械力破碎办法；机械方式又涉及：液体剪切力和固体剪

切力办法，液体剪切力涉及：高压匀浆法和超声破碎法；固体剪切力涉及：高速珠磨法和压

榨法。

26．高压匀浆法破碎率决定于：匀浆阀构造，操作压力，破碎次数。

2当前用于固液分离膜过滤法重要有如下三种：微孔过滤(微滤)、超滤、反渗入。

4在生物物质分离中，可以根据一次进样量多少，将色谱分为：分析色谱、半制备色谱（中

档规模制备色谱）、制备色谱和工业生产规模色谱4大类。

6在色谱过程中，有两种将目的产品从色谱柱上洗脱下来办法：一种是维持流动相热力学

参数不变等梯度洗脱法，另一种叫梯度洗脱法。

8评价HPLC色谱填料性能重要表征指标涉及：

保存值，选取性，柱效率，填充柱总空隙度和穿透性，分离度。

10在HPLC领域内经常可以遇到吸附等温线可以有如下5种（形状）:凸形、凹形、S形、H

形、阶梯形

12常用无机色谱填料重要涉及：多孔硅胶、可控孔径玻璃、氧化铝、氧化钛、羟基磷灰石以

及碳和石墨等基质。

15不同分子量蛋白质在电场中迁移速度与其所带净电荷数成正比，与它自身半径及溶液黏

度成反比。

18．指出三种交联葡聚糖微载体：Cytodex1微载体；Cytodex2微载体；Cytodex3微载体

20．固液分离重要方式涉及：离心法，微孔膜过滤法，双水相萃取，泡沫分离法。

22色谱保存值可以用保存时间也可以用保存体积来表达。

24．指出下列状况下色谱系统对容质柱效和分派系统差关系：

①柱效较高，△K(分派系数)较大,完全分离；

②△K不是很大，柱效较高，峰较窄，基本上完全分离；

③柱效较低，，△K较大,但分离不好；

④△K小，柱效低，分离效果更差。

25．线性色谱吸附等温线是直线，非线性色谱吸附等温线形状常用有：凸形、凹形、S形、

H形、阶梯形。从吸附等温线形状可以预见色谱曲线形状，普通凸形吸附等温线代表色谱图

是拖尾，凹形吸附等温线代表色谱图是吐舌头形状、S形色谱图是波浪形。

27．ShephadexG100是一种凝胶排阻色谱，重要用于蛋白质纯化。

28．DEAE-ShaphdexA25是一种离子互换层析介质。

29．CM-纤维素是一种弱阳离子互换介质。

30．离子互换层析普通是通过梯度普通采用两种办法达到分离蛋白质目。一种是增长洗脱液

离子强度，一种是变化洗脱液pH值。

31．QAE-葡聚糖是强碱阴离子互换剂，SP—是强酸阳离子互换剂。

33．蛋白质含量和纯度测定办法。含量测定:克氏定氮法，TCA比浊度法、双缩脲法、福林-

酚法和紫外线法，考马斯兰法（Bradford法）。

纯度衡量:电泳法，层析法，质谱法等。普通应采用二种以上办法，并且同一原理办法不应

当采用二次。

35．高压匀浆法重要困难涉及：温控和堵塞问题

34．蛋白质分子量测定：超离心法、光散射办法、凝胶过滤法、SDS-PAG、电泳法。

判断对错题

1.微波加热法破碎细胞