动物遗传学：果蝇的三点测交试验.ppt

Cytologicalmapping细胞学定位在细胞水平上观察染色体异常而将基因定位于这一染色体的异常区一般用于对果蝇和哺乳动物的基因定位方法有缺陷定位，病毒影响定位和基因剂量定位Somatichybridization

体细胞杂交定位利用亲缘关系较远的动物或植物细胞融合后会出现染色体丢失的现象而实现将基因定位于某一染色体上Syntenytesting同线性测验Selectingmapping选择定位Translocationanalysis易位定位Deletionanalysis缺失定位Proteinanalysis蛋白质分析定位Dotblotting点杂交定位SouthernBlotting定位Physicalmapping物理学定位Denaturedmapping变性定位TranscriptionalR-loopmapping转录R-环定位Heteroduplexedmapping异源双链定位Insertionandinactivation插入失活定位insituhybridization原位杂交PartialmapofthechromosomesofDrosophilamelanogaster.（二）、基因连锁群的测定生物的每条染色体上聚集着成群的基因。位于同一对同源染色体上的基因即称为一个基因连锁群。人的23对染色体－23个连锁群From《HumanGenetics-Conceptsandapplications》P243，Chapter12Chromosomes1、测定基因所属连锁群的方法⑴、性连锁法哺乳动物中如果某一性状只出现在雄性动物中，则可以肯定控制该性状的基因必在Y染色体上；表现明显的伴性遗传的性状，其基因可定位在X染色体上。⑵、标记染色体连锁法通过分析阐明标记染色体与某一基因的连锁关系将基因定位于该染色体。例：人的Daffy血型基因与人的1号染色体长臂靠近着丝粒的区域变长之间有连锁关系。家系分析表明，该染色体结构的这种变化是遗传的。因此，可将Daffy基因定位于1号染色体。⑶、细胞学基因定位法当异常染色体的发生与某一基因的异常表达呈平行关系时，即可确定该基因与该染色体间的连锁关系。⑷、体细胞杂交定位法体细胞杂交：在人工条件下，亲缘关系较远的两类动植物的细胞可以发生融合，融合后的细胞往往会专一地丢失某一亲本的染色体，而丢失的基因往往是随机的。因此，可用于定位人和其他哺乳动物的基因。例：人、鼠杂种细胞常常丢失人的染色体。利用核酸分子探针（特定基因）与人－鼠杂种细胞进行杂交，含有相应染色体的细胞将呈阳性结果，从而可将该基因定位于某一染色体上。例：人的β-球蛋白DNA探针只与含有人的11号染色体的杂种细胞杂交呈阳性，因此可以判定β-球蛋白基因定位于11号染色体上。2、基因在染色体上位置的测定根据重组率的定位方法，可分为两点测交和三点测交两种。⑴两点测交利用杂交所产生的F1与双隐性个体进行测交，计算两对基因的相对距离。让这两对基因分别与第三对基因分别进行三次两点测交得到这两对基因在染色体上的顺序。⑴两点测交测定次数多，工作量大。每一次两点测交的结果都受特定环境条件的影响，从而使整个实验的测定结果存在不可避免的误差。缺点（一）两点测验两点测验是基因定位的最基本的方法，它是通过一次杂交和一次测交来确定两对基因是否连锁以及它们之间的距离。仅凭一次两点测验结果，不能确定两对基因在染色体上的顺序（即方向）。假如要确定三对基因的位置，要做三个两点测验才能完成。设有A-a、B-b和C-c三对基因，其定位的具体步骤是：

?1、通过一次杂交和一次测交，求出A-a和B-b之间的重组值，根据重组值确定它们是否连锁。

?2、再通过一次杂交和一次测交，求出B-b和C-c之间的重组率，并根据重组率来确定它们是否连锁。

?3、又通过同样的方法确定A-a和C-c是否连锁。

?4、根据三个重组值的大小，确定这三对基因在染色体上的位置。例：玉米籽粒颜色C-c(有色-无)，饱满（Sh）对凹陷（sh）为显性，非糯性（Wx）对糯性（wx）为显性，为了明确这三对基因是否连锁，曾有人做过三个两点测验。

??????1有色饱满×无色凹陷

??????CCShShccshsh

??????有色饱满无色凹陷

??????CcShsh×ccshsh3.6%??????2饱满糯性x凹陷非糯

??????wxwxShShWxWxshsh

??????WxwxShsh