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临床蛋白尿表现、检测方法及检测结果不一致原因
蛋白尿
蛋白尿常表现为尿泡沫增多,尿蛋白定性试验阳性或尿蛋白定量超过150mg/d称为蛋白尿[1]。蛋白尿是泌尿系统疾病最常见的临床表现之一,也可见于如多发性骨髓瘤、阵发性睡眠性血红蛋白尿等血液系统疾病。
蛋白尿检测方法
1)定性法
主要包括干化学法(pH指示剂蛋白误差法)、磺基水杨酸法、加热乙酸法。
医院检验科检测尿常规中尿蛋白的方法多为干化学法,此为尿蛋白定性的重要方法,即利用pH指示剂蛋白误差法原理。当指示剂为溴酚蓝(pH3.0~4.6,黄→蓝),在pH3.2的条件下,酸碱指示剂溴酚蓝产生的阴离子与带阳离子的蛋白质结合生成复合物,引起指示剂进一步电离,当超出指示剂的缓冲范围时,指示剂发生颜色改变,颜色的深浅与蛋白质含量成正比。尿常规检查尿蛋白质定性检测的主要是白蛋白。
2)定量法
有用于总蛋白测定的双缩脲法、丽春红S法、邻苯三酚红钼络合显色法;有用于白蛋白及其他特种蛋白测定的各种免疫学方法;有用于蛋白成分观察的尿蛋白电泳法。
主要为双缩脲比色法,此为尿蛋白定量的重要方法。双缩脲是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。
24小时尿蛋白定量检测的是尿中的总蛋白质,尿中蛋白质包括白蛋白、球蛋白、血红蛋白、本周蛋白和粘蛋白等。
两者结果不一致的原因
1)尿液pH
由于尿常规中的尿蛋白测定是利用pH指示剂蛋白误差原理,因此尿液的pH是影响测试结果的重要因素之一。
当患者服用奎宁、奎宁丁、嘧啶等药物,或尿液中含有聚乙烯、吡咯酮、氯己定、磷酸盐、季铵盐消毒剂时,引起尿液呈强碱性(pH≥9.0)时,会导致假阳性结果。当患者使用青霉素类药物时,引起尿液呈强酸性(pH≤3.0)时,会引起假阴性结果。另外,尿液样本不新鲜、变质导致尿液pH改变或留样误差,均可能导致尿常规蛋白假阴性。
2)检测方法的灵敏度
干化学法主要对尿液中的白蛋白敏感(60~150mg/L),而对球蛋白、黏蛋白、本周蛋白不敏感,对球蛋白的灵敏度仅为白蛋白的1/50~1/100。当尿中球蛋白<4000mg/L时,干化学法尿蛋白结果为阴性,只有当球蛋白达到5500mg/L时才出现阳性反应[3]。
1)任何检验数据都有可能出现信息偏倚,应注意积极复查,推荐以3次检测结果作为确诊依据。
2)患者留取尿常规前,应充分告知留样要求,避免或减少留样误差,女性患者流动水冲洗外阴后留取中段尿,男性患者清洁尿道口后留取中段尿,且尿样均应取自晨尿,并及时送检。
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