自制乙肝质控品的体会.docx

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自制乙肝质控品的体会

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（贵州省疾病预防控制中心附属医院贵州贵阳550008）

【摘要】本文主要介绍根据《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）自制乙肝弱阳性质控品时的体会。在用上科华公司生产的试剂盒（ELISA法）进行

自制乙肝室内质控品时，发现阳性血清在经稀释上万倍后仍能检测出阳性结果，因此，提醒我们医务工作者在执业时加强个人防护很有必要；实验室检测人员在进行检测时必须规范操作；对乙肝表面抗体阴性的高危人群（如检测人员）,应即时全程规范接种乙肝疫苗,增强抵御HBV感染能力等。

【关键词】自制乙肝弱阳性质控品

R446.9B2095-1752（2012）08-0298-02

我们知道，要保证临床检验质量，室内质量控制至关重要，要保证室内质量控制有效，拥有规范的操作是根本，良好的质控品是保证。为降低运行成本，提高实验室操作技能，本室从2011年4月开始试制室内质控品，标准参照《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）[1]。现将试制过程介绍如下：

1.材料和方法

1.1.材料：上海科华公司生产的试剂盒、小牛血清、我院就诊的乙肝（大三阳）患者血清、阳性质控品、北京普朗酶标仪、北京普朗洗板机、水浴箱等。

1.2.方法：ELISA法。

2.操作步骤

2.1.灭活阳性血清：56℃30分钟。

2.2.排试管：首先取10支试管，编号。第1、10管中加入150μl小牛血清。

2.3.稀释阳性血清：取150μl阳性血清，加入到第1管中，混匀后吸取150μl加入到第2管，混匀后吸150μl加入到第3管，…依次加到第10管。则从第1管至第10管的稀释倍数依次为：2、4、8、16…1024。

2.4.加样及检测：取第3至第10管严格按试剂盒说明书进行乙肝表面抗原检测。

3.结果

通过酶标仪检测，结果见表1：

表1：乙肝表面抗原质控品检测结果1

＊注：临界值0.105。

根据《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）规定，弱阳性质控品的吸光度值为临界值的2～3倍为宜[2]。因此，第一次试验数据不能满足要求，于是进行第二次试验，我们选择3500、4000、4500、5000、5500、6000、6500、7000倍稀释倍数进行试验，结果见表2：

表2：乙肝表面抗原质控品检测结果2

＊注：临界值0.105。

从表3不难看出，该标本稀释至14000倍后仍检测出阳性结果。根据《全国艾滋病检测技术规范》（2009版）规定，弱阳性质控品的吸光度值为临界值的2～3倍为宜。本次试验中，8500倍的吸光度为临界值的3.086倍，最为接近，则本次弱阳性质控品的稀释倍数选择为8500倍。

4.结论

通过这次试验，本人有以下几点体会：

1.对乙肝表面抗体阴性的高危人群（如检测人员）,应即时全程规范接种乙肝疫苗,增强抵御HBV感染能力;

2.进行所有的标本检测时一定做好个人防护，保证自身安全，从而保证环境安全，避免因职业暴露而感染乙肝病毒[3]；

3.进行免疫检测加样时，尽可能避免产生气泡，以免阳性标本污染阴性标本而产生假阳性；

4.每次实验完毕后要严格按七步洗手法彻底洗手，避免经皮肤而感染；

5.妥善处理实验废弃物,严格无害化处理后再转出实验室,避免感染其他人员;

6.发生职业暴露后,必须规范处理,避免因职业暴露感染上乙肝[3][4]。

Reference

[1].《全国艾滋病检测技术规范》（2009版），中国疾病预防控制中心,2009年9月.

[2].《全国艾滋病检测技术规范》（2009版），中国疾病预防控制中心,2009年9月.

[3].胡晓燕，吴明辉，简讯.医务人员血源性传播疾病感染现状分析，现代医药卫生，2010，26（5）：654-656.

[4].刘士敬，乙型肝炎的预防措施，中国社区医生，2006年2月26版。

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-全文完-