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临床检验基础技术
嗜酸性粒细胞计数
掌握嗜酸性粒细胞计数法的原理掌握嗜酸性粒细胞计数法的方法学习目标
目录CONTENT01原理02试剂操作步骤03方法学评价0504质量保证参考区间06临床意义07
01原理嗜酸性粒细胞计数是用适当的稀释液将血液稀释一定倍数，破坏红细胞和其他大部分白细胞，并使嗜酸性粒细胞着色，混匀后充入计数池内，计数一定体积内的嗜酸性粒细胞数，即可算出每升血液中嗜酸性粒细胞的数量。
02试剂嗜酸性粒细胞稀释液的主要成分及作用：1）保护嗜酸性粒细胞的成分，比如丙酮、乙醇2）促进红细胞和中性粒细胞破坏的成分，如草酸铵、碳酸钾3）使嗜酸性粒细胞着色的成分，如伊红、固绿
嗜酸性粒细胞稀释液的比较稀释液优点缺点伊红-丙酮试剂简单，简便易行久置效果差，最好每周配制1次皂素-甘油细胞较为稳定，着色鲜明易于鉴别；含甘油，液体不易挥发，置冰箱可保存半年以上含甘油，计数前应充分混匀乙醇-伊红含碳酸钾，溶解红细胞和其他白细胞作用强，视野背景清晰；嗜酸性颗粒鲜明橙色，2小时内不被破坏，含甘油，液体不易挥发，试剂可保存半年以上。含10%甘油，比较黏稠，细胞不易混匀，计数前应充分混匀溴甲酚紫为低渗配方，红细胞和其他白细胞被溶解破坏，嗜酸性粒细胞被染成蓝色?固绿含丙酮、乙醇两种保护剂，使嗜酸性粒细胞膜完整、无破损现象；含碳酸钾、草酸铵，其他细胞破坏完全；固绿使嗜酸性颗粒呈折光较强的蓝绿色注意与残存的不着色或着色很浅的中性粒细胞相区别
03操作步骤计数的简要操作步骤与白细胞计数相似，先加稀释液0.38ml，再取血20μL，混匀后充上、下两个计数池，静置，在低倍镜计数并计算，要注意充的是上、下两个计数池，共10个大方格。
04质量保证在整个操作过程中应注意哪些影响因素呢？1.固定标本采集时间，以免受日间生理变化的影响。。2.稀释液中的乙醇、丙酮等为嗜酸性粒细胞的保护剂，应注意浓度变化以防嗜酸性粒细胞被破坏，使结果偏低3.嗜酸性粒细胞在稀释液中易发生聚集，要及时轻轻混匀，以免嗜酸性粒细胞破坏4.稀释后30分钟～1小时内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞逐渐破坏或不易辨认，使结果偏低。5.计数时嗜酸性粒细胞形态应与残留的中性粒细胞区别。
05方法学评价嗜酸性粒细胞的显微镜计数法血细胞分析仪法设备简单、费用低廉；但费时、重复性较差。操作简便，效率高，重复性好；但仪器较贵；适合于大批量的标本集中检测；用于筛查。
06参考区间嗜酸性粒细胞的参考区间是（0.05～0.5）×109/L
07临床意义若是出现增减，应从生理、病理两个方面进行分析1）生理性减少见于肾上腺皮质激素的使用2）病理性增多的情况见于①超敏反应疾病②寄生虫病③某些皮肤病④血液病，如慢性粒细胞白血病⑤某些恶性肿瘤，特别试淋巴系统的恶性肿瘤⑥某些传染病：如猩红热
07临床意义若是出现增减，应从生理、病理两个方面进行分析3）病理性减少见于①伤寒、副伤寒，大手术后②长期使用肾上腺皮质激素除此之外，嗜酸性粒细胞计数还可有其他用处，比如可用来观察急性传染病的预后，观察大手术和烧伤患者的预后，用于肾上腺皮质功能的测定等。
谢谢，再见！
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