HJ 347.1-2018 水质 粪大肠菌群的测定 滤膜法.docxVIP

目次

前言 i

1适用范围 1

2规范性引用文 1

3术语和定义 1

4方法原理 1

5于扰和消除 1

6试剂和材料 2

7仪器和设备 2

8样品 3

9分析步骤 3

10结果计算与表示 5

11精密度和准确度 6

12质量保证和质量控制 6

13废物处理 7

14注意事项 7

附录A(资料性附录)粪大肠菌群检验记录及报告格式 8

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ii

前言

为贯彻《中华人民共和国环境保护法》和《中华人民共和国水污染防治法》,保护生态环境，保障人体健康，规范水中粪大肠菌群的测定方法，制定本标准。

本标准规定了测定地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的滤膜法。

本标准是对《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)》(HJ/T347-2007)滤膜法部分的修订。

本标准首次发布于2007年，原起草单位为中国环境监测总站。本次为第一次修订。本次修订的主要内容如下：

——完善了方法原理的表述；

——增加了检出限；

增加了规范性引用文件、术语和定义、干扰和消除、仪器和设备、样品采集、样品保存、精密度和准确度、质量保证和质量控制、废物处理等章节；

白本标准实施之日起，《水质粪大肠菌群的测定多管发酵法和滤膜法(试行)》(HJ/T347-2007)废止。

本标准的附录A为资料性附录。

本标准由生态环境部生态环境监测司、法规与标准司组织制订。本标准起草单位：辽宁省环境监测实验中心。

本标准验证单位：大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、锦州市环境监测中心站、辽阳市环境监测站、铁岭市环境保护监测站和沈阳市疾病预防控制中心。

本标准生态环境部2018年12月26日批准。

本标准白2019年6月1日起实施。本标准由生态环境部解释。

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水质粪大肠菌群的测定滤膜法

1适用范围

本标准规定了测定水中粪大肠菌群的滤膜法。

本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的测定。

本方法的检出限：当接种量为100ml时，检出限为10CFU/L;当接种量为500ml时，检出限为2CFUL。

2规范性引用文件

本标准引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。

GB/T14581水质湖泊和水库采样技术指导HJ494水质采样技术指导

HJ/T91地表水和污水监测技术规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本标准。

3.1

粪大肠菌群fecalcoliforms

又称耐热大肠菌群(thermotolerantcoliforms)。44.5℃培养24h,能在MFC选择性培养基上生长，发酵乳糖产酸，并形成蓝色或蓝绿色菌落的肠杆菌科细菌。

3.2

菌落形成单位oolory-formingunits(GFU)单位体积样品中的细菌群落总数。

4方法原理

样品通过孔径为0.45μm的滤膜过滤，细菌被截留在滤膜上，然后将滤膜置于MFC选择性培养基上，在特定的温度(44.5℃)下培养24h,胆盐三号可抑制革兰氏阳性菌的生长，粪大肠菌群能生长并发酵乳糖产酸使指示剂变色，通过颜色判断是否产酸，并通过呈蓝色或蓝绿色菌落计数，测定样品中粪大肠菌群浓度。

5干扰和消除

5.1活性氯具有氧化性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集(8.1)

2

时加入硫代硫酸钠溶液(6.6)消除干扰。

5.2重金属离子具有细胞毒性，能破坏微生物细胞内的酶活性，导致细胞死亡，可在样品采集(8.1)时加入乙二胺四乙酸二钠溶液(6.7)消除干扰。

6试剂和材料

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂或生物试剂，实验用水为蒸馏水或去离子水。

6.1MFC培养基。

胰陈

蛋白陈

酵母浸膏氯化钠

乳糖

胆盐三号

1%苯胺蓝水溶液

1%玫瑰红酸溶液(溶于8.0gL氢氧化钠液中)

10g5g3g5g12.5g1.5g10ml

10ml

将上述培养基中的成分(除苯胺蓝和玫瑰红酸外),溶解于1000ml水中，调节pH至7.4,分装于三角烧瓶内，于115℃高压蒸汽灭菌20min,储存于冷暗处备用。临用前，按上述配方比例，用灭菌吸管分别加入已煮沸灭菌的1%苯胺蓝水溶液1ml及1%玫瑰红酸溶液 (溶于8.0g/L氢氧化钠液中)1ml,混合均匀。如培养物中杂菌不多，则不加玫现红酸亦可。加热溶解前，加入1.2%～1.5%琼脂可制成固体