人SUMO-3基因原核表达载体的构建、多克隆抗体的制备的开题报告.pdfVIP

人SUMO-3基因原核表达载体的构建、多克隆抗体

的制备的开题报告

一、研究背景和意义

人SUMO（SmallUbiquitin-likeModifier）是一种小分子蛋白质，可

通过共价结合改变靶蛋白的性质和活性，参与许多生物学过程。

SUMOylation作为一种广泛存在的调控机制，与许多疾病的发生有关。而

SUMO-3可能是最常见的一种SUMO亚型，目前涉及其研究的大多数都

是在哺乳动物细胞中，鲜有研究集中于原核表达系统。因此本研究拟构

建人SUMO-3基因原核表达载体和多克隆抗体，以期进一步研究SUMO-

3在原核表达系统中的表达、纯化和功能等方面，为探讨SUMOylation调

控、对疾病的作用机制提供一定的支持。

二、研究内容和步骤

1.构建人SUMO-3基因的原核表达载体

通过PCR技术获得SUMO-3编码区域的DNA序列，选用pET-

28a(+)质粒为载体，选用适当的限制酶将SUMO-3DNA序列和载体进行

连接，得到原核表达载体pET28a(+)-SUMO-3。构建完成后，通过DNA

序列测定验证得到正确的SUMO-3基因原核表达载体。

2.人