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中国儿童来源艰难梭菌分子型别和耐药特征分析

【摘要】目的了解我国儿童感染艰难梭菌的分子型别和耐药特征，为开展疾

病风险评估和疾病负担研究提供支持。方法利用2010-2023年从我国14个省

（自治区、直辖市）收集的155株12岁儿童来源的艰难梭菌菌株，采用菌株分

离培养鉴定、PCR检测和药敏实验等方法，分析其分子型别和耐药特征。结果1

55株艰难梭菌中鉴定出26个序列型（ST）和18个核糖体分型（RT），其中ST

主要型别有ST3型（20.65%）、ST54型（16.13%）、ST35型（12.90%）；RT主

要型别有RT012/ICDC007型（14.84%）、RT001/ICDC001型（11.61%）、RT046/

ICDC018型（8.39%）。同时发现1株高毒力菌株RT078和27株非产毒菌株；毒

素基因以tcdA+tcdB+cdt-菌株为主；所有菌株对甲硝唑和万古霉素敏感，多重

耐药菌株有29株，其中1株菌株对除万古霉素和甲硝唑以外的其他7种抗生素

均有耐药性。结论我国儿童艰难梭菌的分子型别和耐药特征与我国全人群情

况基本一致，但存在地区分布差异。应加强对我国儿童艰难梭菌感染的常规耐药

监测。

【关键词】艰难梭菌；分子特征；耐药性；儿童

艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧菌，可引起人的艰难梭菌感染（CDI），是抗

生素相关腹泻和医疗机构相关性腹泻的主要病原。2019年美国发布的抗生素耐

药威胁分类中，艰难梭菌被列为“紧迫威胁”［1］。艰难梭菌的致病机制与其

分泌的毒素有关，主要有tcdA和tcdB基因编码的肠毒素A和细胞毒素B，均能

独立诱发CDI并引起不同的后果，可导致肠道细胞病变和严重的炎症反应。此外，

某些艰难梭菌还能产生二元毒素，可能会在上皮细胞形成基于微管的突起，理论

上可能会产生临床影响［2］。已有研究显示，tcdA-tcdB-cdt+菌株导致了严重

的CDI发病［3］。CDI的临床表现轻重不一，可因年龄而异［4］，从无症状定

植、自限性腹泻到结肠炎、伪膜性肠炎、中毒性巨结肠，严重者甚至可导致死亡

［5］。新生儿和≤12月龄的腹泻患儿进行CDI检测［5］。与成年人相比，儿

童CDI发生率较低，更多见于社区感染，部分CDI病例可自行缓解，通常不需要

治疗。儿童CDI的治疗主要基于成年人治疗建议，准确、快速和有效的检测技术

和诊断方法在成年人方面已得到充分证明，而在儿童中，区分产毒定植与感染需

要治疗的有效诊断仍然存在争议［6］。此外，儿童携带还有可能成为成年人感

染的蓄积库，美国和英国已有调查研究显示，引起成年人CDI的菌株与从儿童中

分离出的菌株之间有基因组重叠的可能性［7］。造成成年人感染的主要风险因

素是老年人群和抗生素暴露；但在儿童中，往往会看到患有CDI的儿童具有潜在

的免疫缺陷，如血液系统恶性肿瘤和炎症性肠病等特殊合并症的患儿。有研究指

出，应重新评估以前确定的风险因素和易感患者人群，如新生儿、幼儿和门诊患

者［8］。艰难梭菌在欧美国家经历暴发流行后，近年来大多数国家报告的发病

率基本保持稳定，仅部分国家有所下降或上升［9］，但CDI带来的死亡率和经

济负担仍非常大。据美国CDC估计，223900例CDI患者中，约有12800例死亡，

并导致约10亿美元的医疗费用［1］。鉴于CDI的疾病负担较高，带来严重临床、

社会和经济影响［10］。本研究对我国部分地区12岁儿童来源艰难梭菌的多位

点序列分型、核糖体分型（RT）和毒素基因等分子流行病学和耐药特征等进行研

究，以促进对儿科患者中CDI的进一步了解和认识，并为后续开展疾病风险评估

和疾病负担研究提供数据支持。

材料与方法

1.菌株来源：中国CDC传染病预防控制所院感控制室于2010-2023年收集的

从我国云南、山东、湖南、北京、河北、广西、浙江、江西、吉林、河南、上海、

陕西、四川和海南14个省（自治区、直辖市）12岁腹泻患儿中分离获得的15

5株艰难梭菌菌株。

2.菌株分离培养鉴定：艰难梭菌粪便样本分离培养鉴定操作方法见中华预防

医学会团体标准《艰难梭菌感染诊断（T/CPMA008-2020）》［11］。艰难梭菌为

专性厌氧菌，在厌氧血平板及选择性平板上均可生长，可根据其在环丝氨酸-头

孢西丁-果糖琼脂培养基上呈“摊鸡蛋样”菌落及特殊马粪臭味识别可疑菌落。

挑取单克隆可疑菌落在添加了5%绵羊血的脑心浸液琼脂平板上于37℃厌氧环境

中纯化。细菌DNA的提取根据细