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DB14/T630—2015
马铃薯脱毒试管苗（薯）繁育技术规程
1范围
本标准规定了马铃薯脱毒试管苗（薯）繁育的术语、定义和缩略语，生产设施、仪器设备、试剂和培养基，MS培养基和植物生长调节剂母液的配制，脱毒技术，试管苗扩繁和试管薯诱导等内容。
本标准适用于山西省马铃薯脱毒试管苗（薯）的繁育。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB7331马铃薯种薯产地检疫规程
GB18133马铃薯种薯
GB20464农作物种子标签通则
GB/T28660马铃薯种薯真实性和纯度鉴定SSR分子标记
NY/T401脱毒马铃薯种薯（苗）病毒检测技术规程
NY/T1962马铃薯纺锤块茎类病毒检测
NY/T1963马铃薯品种鉴定
NY/T2678马铃薯6种病毒的检测RT—PCR
NY/T2744马铃薯纺锤块茎类病毒检测技术核酸斑点杂交法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
试管苗plantlet
应用植物组织培养技术在封闭容器内繁殖的种苗。
3.2
脱毒核心试管苗coreplantlet
应用茎尖分生组织培养技术获得的，不带PVX、PVY、PVS、PVA、PVM、PLRV和PSTVd，经鉴定具有原品种特征特性的试管苗。
3.3
脱毒基础试管苗basicplantlet
由脱毒核心试管苗繁殖的、用于保存和大量扩繁的无病毒试管苗。
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3.4
脱毒试管苗in-vitroVirusfreeplantlet
由脱毒基础试管苗大量扩繁的、用于繁育试管薯和原原种的无病毒试管苗。
3.5
脱毒试管薯Microtuber
无菌条件下，在封闭培养容器内用脱毒试管苗诱导形成的小块茎。
3.6
原原种pre-elite
用脱毒试管苗或脱毒试管薯在防虫网室（棚）等严格隔离条件下，采用无土栽培技术生产的、经质量检测达到GB18133相应要求，用于原种生产的微型薯。
4缩略语
下列缩略语适用于本文件。
PVX：马铃薯X病毒（PotatovirusX）
PVY：马铃薯Y病毒（PotatovirusY）
PVS：马铃薯S病毒（PotatovirusS）
PVM：马铃薯M病毒（PotatovirusM）
PVA：马铃薯A病毒（PotatovirusA）
PLRV：马铃薯卷叶病毒（Potatoleafrollvirus）
PSTVd：马铃薯纺锤块茎类病毒（Potatospindletuberviroid）
DAS-ELISA：双抗体夹心酶联免疫吸附测定（DoubleAntibodySandwichELISA）R：双向聚丙烯酰胺凝胶电泳法（ReturnPolyacrylamideGelElectrophoresis）
RT-PCR：反转录-聚合酶链式反应（ReverseTranscription-PCR）
NASH：核酸斑点杂交（NucleicAcidSpotHybridization）
MS：MS培养基（MurashigeSkoog(1962)）
6-BA：6-苄胺基嘌呤（6-Benzylaminopurine）
CCC：矮壮素（ChlormequatChloride）
IBA：吲哚丁酸（Indole-3-ButyricAcid）
KT：激动素（Kinetin）
IAA：吲哚乙酸（Indole-3-AceticAcid）
B9：丁酰肼（Daminozide）
AR：分析纯（AnalyticalReagent）
5生产设施、仪器设备、试剂和培养基
5.1生产设施
风淋室、更衣室、洗涤室、配制室、灭菌室、仪器室、接种室（无菌操作室）、组培室、检测室。
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5.2仪器设备配置
5.2.1更衣室：紫外线灯、更衣柜、消毒柜、洗手池、工作服、接种服、工作帽、口罩、拖鞋或鞋套
等。
5.2.2洗涤室：紫外线灯、试验台、洗涤池、洗瓶机、晾瓶架、蒸馏水器、洗涤用具、周转箱等。
5.2.3配制室：试验台、电子天平、pH计、磁力搅拌器、电冰箱、蒸煮锅、培养基制备机、定量灌装机、紫外线灯、烧杯、量筒、移液管、玻璃搅拌棒、容量瓶、试剂瓶、分注器等。
5.2.4灭菌室：鼓风干燥箱、压力蒸汽灭菌器、微波炉、紫外线灯等。
5.2.5仪器室：光照培养箱、人工气候箱、冰箱等。
5.2.6接种室：臭氧消毒
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