UreB双效卵黄抗体(IgY)的制备与应用的开题报告.pdfVIP

抗CCK39/UreB双效卵黄抗体(IgY)的制备与应用的

开题报告

一、研究背景及意义

CCK39是一种胆囊收缩素（cholecystokinin）的前体肽，在肠道中

发挥促进胰岛素分泌、抑制胃排空、促进胆囊收缩等多种生理作用。

UreB是马钱子碱酶的一个亚单位，在幽门螺杆菌中起到重要的作用。由

于CCK39和UreB在某些疾病中扮演着重要的角色，因此研究这两个分

子的抗体对诊断和治疗相关疾病具有重要意义。

传统的获得单抗的方式包括小鼠、兔子等的免疫制备，然而这种方

法存在一些缺点，如容易导致动物死亡或高度病态、易受到抗原抗体效

应的干扰等。而现在越来越多的研究者开始采用鸟类制备双抗体（IgY）

的方法，因为IgY具有更高的亲和力和更长的稳定性，同时制备过程中

更环保。

因此，本研究旨在通过鸟类制备出抗CCK39/UreB双效卵黄抗体

（IgY），为相关疾病的诊断和治疗提供有力支持。

二、研究方法

1.抗原制备

CCK39和UreB的编码序列经过PCR扩增后，将其克隆到质粒表达

系统中表达重组蛋白。蛋白经过纯化后用于免疫制备。

2.鸡的免疫和抗体制备

将抗原以微量油乳剂（MF59）为混悬液注射到鸡的背脊部皮下，每

个鸡连续注射两次，隔一周注射一次。免疫程序结束后，鸡蛋中的黄体

取出，以适当稀释后加入抗原，制备特异性IgY。

3.IgY的纯化和特性分析

采用硫酸铵盐析法纯化IgY，并用SDS鉴定IgY的纯度和分子

量，同时进行Westernblot验证IgY的特异性。

三、研究预期结果

1.成功制备出高效、稳定、绿色环保的抗CCK39/UreB双效卵黄抗

体（IgY）。

2.对制备的IgY进行鉴定和评价，验证其特异性和稳定性，评估其

在诊断和治疗相关疾病中的应用前景。

3.为临床应用提供良好的应用基础，为该领域的研究提供理论和实

践支持。