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RACE法克隆紫花苜蓿光敏色素A基因的开题报告

题目：RACE法克隆紫花苜蓿光敏色素A基因

背景：

紫花苜蓿（Medicagosativa）是一种重要的苜蓿种子草之一，被广

泛用于草地土壤修复、动物饲料生产以及碳循环等领域。光敏色素是一

种吸收光子的分子，主要参与植物的光合作用。光敏色素A

（phytochromeAphyA）是紫外光反应的核心，具有调节植物生长和发

育、维持光信号传导等多重功能。因此，克隆紫花苜蓿的光敏色素A基

因，对于深入研究光信号调控机制、提高紫花苜蓿的生产能力具有重要

意义。

目的：

本研究旨在利用RACE技术克隆紫花苜蓿光敏色素A基因，为后续

深入研究光信号调控机制奠定基础。

方法：

1.RNA提取：从紫花苜蓿的嫩叶中提取总RNA，利用DNaseI酶消

化DNA。

2.一步PCR：利用已知的光敏色素A基因序列设计一对引物，进行

一步PCR，以验证引物的可靠性。

3.5’RACE3’RACE：通过5’RACE和3’RACE反向转录PCR

扩增光敏色素A基因的5’端和3’端，最终将两个扩增产物拼接在一起

得到光敏色素A基因的全长序列。

4.序列分析：将光敏色素A基因的序列进行测序和分析，利用生物

信息学工具预测其功能和结构域等特征，并与国际上已知的类似基因序

列进行比对分析。

预期结果：

本研究将成功克隆出紫花苜蓿光敏色素A基因的全长序列，并初步

分析其功能和结构域等特征。通过比对分析，我们将进一步了解光敏色

素A基因在紫花苜蓿中的作用机制，为后续进行进一步研究奠定基础。