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线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型）的经验

本人现在正在做线栓法大鼠大脑中动脉阻断实验（MCAO模型），

这方面的资料我查了一些，这个实验我也作了一段时间，不敢说很专

业了，不过现在基本上我能在15min左右完成手术，而且手术过程中

不出一滴血，造模后缺血程度基本一致。虽然前面有很多前辈发了很

多MCAO的很专业的贴子，不过我觉得比较凌乱，现在我把我的心得

体会和以前的贴子的精华部分奉献给大家，希望这会对将要做这个实

验的朋友有一丝的帮助。虽然做实验总会有郁闷的时候，不过风雨之

后总会见到彩虹的，这可以也是我的心得体会。衷心祝福大家能把实

验做的成功、完美！

实验前准备

麻醉剂：水合氯醛（应较好的控制大鼠体温）

保温：60W白炙灯高度为37cm直接照射能使肛温保持在37℃

栓线的制备：1.取熔点为56℃的固体石蜡一块，在瓷杯中加热熔

化。直径为o．24mm、长5cm的鱼线一端5mm长的一段，垂直在

熔化的石蜡中迅速浸入并提起，立即凝固的一薄层石蜡可牢固地粘附

在鱼线一端的表面，其直径为0.26mm。就这样，普通的鱼线即可变

成规相一致头端光滑圆钝的栓线。

2.在鱼线18mm的位置用涂改液标记一个白色点。

TTC的配制：用0.2mol/L磷酸缓冲液（PBS）配成2%TTC溶液

（pH7.5）,避光保存。

体重与栓线直径：线栓直径0.24mm采用的SD大鼠，体重250-

300g。

实验方法：

动物用10％水合氯醛（35mg/kg）腹腔注射麻醉。仰卧位固定，

颈正中线切口，沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜，分离左侧颈总动

脉（CCA）、颈外动脉（ECA）和颈内动脉（ICA），在CCA远心端

和近心端及ECA处挂线备用。用微动脉夹暂时夹闭ICA，然后近心端

结扎CCA、ECA。然后在距CCA分叉部4mm处剪一小口，将拴线插

入到ICA，这时用绕在CCA远心端的细线轻轻系牢拴线。

（不可过紧，否则近线困难，但松了又会出血。）用眼科镊轻推

拴线，从血管分叉处开始算距离，当插入深度在18mm时（一定要将

血管放松至原来状态,且保证标记点在分叉处,由于标记的是白色的所以

很容易看的），紧紧系牢CCA远心端的细线，此时的关键是动作轻柔，

不要使ICA有任何的牵拉，否则栓线会脱出ACA，可能会造成缺血失

败。血管外的栓线不要留得过长，更不要缝在皮外，大鼠醒来后会自

己拔出。缝合伤口，单笼饲养观察。如果需要再灌的话，就把拴线抽

出即可，因为脑底有个动脉环，结扎一侧颈总动脉大脑不会缺血的。

注意事项：

1．分离时要层次清楚：正中剪开SD大鼠颈部皮肤，分离皮下结

缔组织时会发现该组织与颈部两侧鼓泡腺体（很多人误认为那是甲状

腺）结合紧密，因此不必分离过于太细，直接在正中两侧鼓泡腺体之

间分离，这样能不接触胸锁乳突肌而直接暴露颈前颈群且不会损伤腺

体造成过多出血。

下一步是分开颈前肌群，这时候要注意用小钳子作撑开分离动作

要在左右肌肉块之间而不是一块肌肉的肌纤维之间，虽然它们看起来

很模糊，但这样能保证不会出现较多条索状细肌纤维条影响下一步颈

内动脉的寻找与分离，并且能整块地向一侧牵开颈前肌群暴露颈动脉

鞘。见到颈动脉鞘了则要注意细致分离迷走神经，若损伤则可能影响

其呼吸而死亡的。

2.分离血管时，要尽量将血管剥离的干净些，这样在用眼科剪剪

口时就不会误剪外膜（误剪的话再剪就很容易把口剪大了或者剪断了，

要注意口子越小越好插线），且要剪一个斜行的切口（眼科剪与血管

约成45度），这样在血液刚流出时仍能看上翻的断口管壁，这样即容

易插入栓线且