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HIV核酸检测技术应用现状

自1981年在美国被发现以来，艾滋病(AIDS)就呈不断蔓延的趋势[1]。

2017年全球共报告新发HIV感染180万(140万～240万)，HIV感染者达3690

万人(3110万～4390万)[2]。2017年(2017年1月1日零时至12月31日24时)

全国(不含港澳台)共报告法定传染病发病7030879例，死亡19796人，其中艾滋

病死亡15251例(77.04%)[3]。目前艾滋病尚未有根治的方法和有效的疫苗，因

此艾滋病的防治工作主要是控制艾滋病的传播，以预防为主，普及艾滋病的检测，

尽早地发现感染者[4]。而HIV实验室检测技术则是开展艾滋病各项预防、治疗

以及干预措施的基本手段之一。HIV的实验室检测主要包括血清学检测、淋巴细

胞检测和核酸检测[5]。血清学检测一般用于艾滋病常规筛查和确证实验，检测

血清中HIV抗原或(和)抗体，易于自动化且成本较低[6]，但是不能应用于HIV

感染者的治疗及用药监测。淋巴细胞检测主要用于了解机体的免疫状态、确定用

药治疗时机及疾病分期、判断治疗效果和临床并发症等[7]，但是这种方法的特

异性较低，仅作为艾滋病患者确证后的检测手段，不能用于艾滋病的早期诊断。

而核酸检测由于灵敏度和特异性高，窗口期短[8](HIV感染者血浆中HIVRNA出

现时间早，病毒感染后约10天，在血浆中病毒载量即达到核酸扩增技术可检测

出的水平)，因此可以用于艾滋病的早期诊断，并且其在临床治疗效果、耐药性

的监测及病程的监控、预测等方面均有广泛的应用[9]。根据不同的应用场景，

HIV核酸检测可以分为：大型医院、基层卫生服务机构(社区卫生服务中心、乡

镇卫生院等)以及家庭检测。

1大型医院的HIV核酸检测

目前临床上很多大型医院如三级医院等都有分子生物学实验室，能够满

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足HIV核酸检测的环境及人员要求。在大型医院，HIV的核酸检测主要依赖于自

动化或半自动化的大型仪器，能够实现较高通量的核酸检测，满足大样本量的需

求，可分为定性和定量检测。截至目前，通过我国药品监督管理局医疗器械注册

且仍在有效期内的HIV核酸检测试剂有11种(表1)，其中进口产品3项，国产8

项。定性检测主要用于艾滋病的早期诊断，常用的检测试剂盒有欧盟批准生产的

AbbottM2000HIV-1RNA/DNA定性检测试剂，使用Taqman探针法进行检测;美国食

品与药品监督管理局(FoodandDrugAdministration，FDA)批准的Gen-Probe公司

生产的AptimaHIV-1RNA核酸定性检测试剂在临床中也有应用[10]，其检测原理

为转录介导的等温扩增系统(transcriptionmediatedamplification，TMA)结合

化学发光标记的探针杂交检测，检测的靶基因为HIV-1LTR和多聚酶基因。定量

检测可用于艾滋病的早期诊断、监测抗病毒治疗效果及疾病进展。临床上常用的

定量检测试剂包括美国罗氏分子诊断公司研发的RocheCobasTaqManv2.0和美国

AbbottMolecular公司生产的AbbottRealTimeHIV-1检测试剂盒。其技术主要基

于实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)的方法对血清中HIV核糖核酸

/脱氧核糖核酸(RNA/DNA)进行定量分析，上述两种试剂盒主要应用了Taqman水

解探针法，自1996年美国PerkinElmer公司发明TaqMan技术以来[11]，该技术

如今已经被广泛应用到HIV基因检测[12]。法国Biomerieux公司生产的

NucliSENSEasyQHIV-1v2.0应用了分子信标技术这，种基于非水解探针的分子信

标技术也是较常用的一种核酸检测方法，在检测HIV-1病毒载量时与TaqMan探

针法具有较好的相关性和一致性[13-14]，但分子信标探针设计较为复杂且成本

较高。实时荧光定量PCR技术与常规的PCR技术相比[15]，特异性更高，不仅能

够有效地解决PCR过程的污染问题，而且具有自动化程度高等特点。目前实时荧

光定量P