肺部感染诊断难点病原学诊断的规范化和新技术.ppt

***********************************************************************Dr.HUBijie*挑战：我国临床微生物实验室对呼吸道病毒检验技术严重滞后案例重症社区肺炎的病毒类微生物很难送检原因大多数快速检验的试剂盒国内没有引进通常送CDC实验室程序复杂早期快速诊断有难度第64页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*我国亟需引进、建立

非培养的病原体检测技术GM试验，G试验军团菌和肺炎链球菌尿可溶性抗原检测肺炎支原体、肺炎衣原体血清学检测呼吸道病毒检测第65页,共66页，星期六，2024年，5月*感谢大家观看第66页,共66页，星期六，2024年，5月****************************143. IatronserotypingkitcanbeusedtoserotypeisolatesofCryptococcusneoformans.*******************************Dr.HUBijie*湿片检查真菌检查：与含有10%甘油的10%KOH混合于载玻片上，盖上盖玻片，湿盒中放置15～30min有经验的技术员可轻易识别皮炎芽生菌、粗球孢子菌和新型隐球菌；可检出丝状菌；有动力的病原体，如一种引起二重感染的粪小杆线虫，可以在湿片中发现。鞭毛虫（？）第32页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*第33页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*BAL离心沉淀物细胞学检查推荐微生物涂片数量染色方法细菌1革兰染色军团菌5荧光抗体染色真菌2Gomori乌洛托品银染色，湿片检查分枝杆菌3抗酸染色病毒含单克隆抗体染色测CMV、HSV等肺孢子菌3Gomori乌洛托品银染色第34页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*咳痰培养必须用半定量方法定性鉴定的普通培养方法不易区分感染菌或污染菌；标准定量培养方法繁琐，建议用半定量方法；方法：四区划线接种标本进行培养，每划一区后均需火烧接种环，使细菌在平板上生长数逐级下降；报告：优势菌生长菌落为3+或3+以上。也可分大量heavy、中等量moderate和少量scattering生长三种；可以只鉴定和报告优势生长的需氧菌和兼性厌氧菌。只在原始区生长的少数菌不必作常规鉴定，除非临床或直接革兰染色提示可能为感染的病原菌。第35页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*划线接种平板半定量判断标准分级划线区域菌落数原始区第二区第三区1＋＜102＋＞10＜53＋＞10＞5＜54＋＞10＞5＞5第36页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*痰标本的培养基选择培养基包括分离和鉴别革兰阳性菌的血平板、革兰阴性菌鉴别的平板如麦康凯平板；涂片显示嗜血杆菌样或奈瑟菌样的优势菌（每油镜视野≥10个细菌）时，应增加接种富含营养的巧克力平板，分离流杆、脑膜炎、卡他；痰涂片发现较多GNB或系医院内肺炎的痰标本，应加麦康凯平板；应少用培养平板进行细菌分离，要熟悉细菌在培养基上的生长模式，而不是靠选择培养基。第37页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*培养环境：CO2平板置于3％～10％CO2中35-37℃孵育。烛缸可基本达到这一要求，但近年来的研究显示用CO2培养箱分离肺炎链球菌和流感嗜血杆菌要明显优于烛缸。为提高细菌培养和分离质量，细菌室应常规配备CO2培养箱，呼吸道标本在初代培养时尤为重要。第38页,共66页，星期六，2024年，5月*Dr.HUBijie*菌落观察与鉴定平板孵育过夜（18-24h），观察并记录有几种不同的菌落类型。咳痰标本：优势菌几种菌落应分离鉴定。直接采集的下呼吸道标本如PSB、BAL、TNA、胸腔穿刺液中生长的所有菌落类型均应鉴定。如果病人已接受抗生素治疗或革兰染色所见细菌未分离到，48h后应重新观察平板。某一菌落是否需要鉴定，应根据其引起下呼吸道感染的可能性和病例的临床特征来决定。第39页,共66页，星期六，