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摘要
三重基序蛋白25(Tripartitemotif-containingprotein25,TRIM25)在鱼非特异性免疫
中发挥关键作用。本实验通过在大黄鱼饲料中添加不同比例中草药复方(太子参、巴
戟、当归、枸杞、茯苓、白术等),饲喂30天后,以脾脏组织为实验材料,通过实时
荧光定量PCR技术,分析饲喂中草药后TRIM25基因的相对表变化。结果显示:与对
照组相比,各实验组中该基因的表均出现了不同程度的下降(E5组除外),E3组的
表量下降最多(64%),其次是E1组(47%),E5组的表量比对照组升高19%,
但每组之间无显著性差异(P0.05)o本研究结果为中草药作为饵料添加剂在大黄鱼饲
料中的应用提供了基础数据,也为中草药作为鱼类免疫增强剂提供了前期研究基础。
关键词:大黄鱼;中草药;TRIM25
Abstract
Tripartitemotifcontainingprotein25(trim25)paysakeypartininnateimmunityof
fish.Inthisexperiment,thereativeexpressionoftrim25genewasanayzedbyadding
differentproportionofChineseherbacompound(RadixPseudosteariae,Morindaofficinais,
angeica,wofberry,Poriacocos,Atractyodesmacrocephaa)tothefeedofargeyeow
croaker,andfeedingitfor30days.Fromtheresuts:contrastwiththecontrogroup,the
expressionofthegenedecreasedindifferentdegreesineachexperimentagroup(exceptE5
group),themostdecreasedexpressioninE3group(64%),foowedbyEgroup(47%),and
theexpressioninE5groupincreasedby19%contrastwiththecontrogroup,buteverytwo
setsofdataareamostidentica,mathematicayspeaking(P0.05).Theresutsofthisstudy
suppysimpedatafortheappicationofChineseherbamedicineasbaitadditiveinthefeed
ofargeyeowcroaker,andasoprovidethepreiminaryresearchbasisforChineseherba
medicineasfishimmuneenhancer.
Keywords:argeyeowcroaker;Chineseherbamedicine;TRIM25;
目录
1引言2
1.1大黄鱼2
1.2中草药及太子参主要简介2
1.3TRIM25基因4
2材料和方法5
2.1材料、药品及仪器5
2.1.1原料鱼处理5
2.1.2试剂6
2.2方法6
2.2.1总RNA提取6
2.2.2RNA凝胶电泳7
2.2.3RNA定量分析7
2.2.4RNA反转录7
2.2.5实时荧光定量PCR8
3实验结果及分析9
3.1RNA的质量检测9
3.2熔解曲线分析10
3.3基因表分析1
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