CLSI药敏试验标准的应用.pptx

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CLSI药敏试验标准的应用;摘要…………1

委员会成员…………………5

本文件主要变化简介……………………13

CLSI建立解释标准和质量控制过程简介………………16

CLSI参考方法与商品化方法和CLSI与FDA解释标准(折点)…………17

自2010年以来CLSI折点的增加及修订…………………18

抗菌药物敏感性试验分委会宗旨声明…………………20

表格使用说明……………21;Table1A-1C抗菌药物的分组;药敏试验分组药物选择及报告; CLSI的三级划分制及临床意义

?高度敏感(S):当一种细菌引起的感染,用该种药物常用剂量治疗有

效,这种细菌即对该药物高度敏感,即常规用药时达到的平???血浓度超

过对细菌MIC的5倍以上(Cmx高于待检菌MIC4-8倍)

?中介(I):当细菌引起的感染,仅在应用高剂量抗菌药物时才有效,

或者细菌处于体内抗菌药物的浓缩部位,如尿液、胆汁等才被抑制,这

种细菌对该药物中度敏感。常规用药时达到的平均血浓度一般相当于或

略高于对细菌的MIC

;?耐药(R):药物对某一细菌的MIC高于药物在血或体液中可能达到的浓

度,有时细菌能长生灭活抗菌药物的酶,则不论其MIC值大小如何,均应判定该菌为耐药

;8;New!;药敏选择标准

CLSI规则;;临床微生物实验室的药敏试验对临床合理选用抗;做药敏之前我们应知道什麽;举例一;举例二;举例三;举例四;举例五;

二、标准化的药敏试验方法;常用的药敏试验方法;不能做纸片扩散法的细菌;适合做E-试验的细菌;纸片扩散法:MH培养基,pH7.2-7.4,做成琼脂厚度4mm,直径90mm的平板;挑取孵育16-24小时已分纯菌落,置于生理盐水管中,振荡混匀后校正浓度至0.5麦氏标准;用无菌棉拭子蘸取菌液,在试管内壁旋转挤去多余菌液;然后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次,每次旋转平板60度;平板在室温下干燥3-5分钟,用无菌镊子或纸片分配器将纸片紧贴于琼脂表面,各纸片中心距离应大于24mm,纸片???平板内缘大于15mm。;8.35℃孵育16-24小时量取抑菌圈直径

9.按照CLSI标准判读,报告敏感、中介、耐药;稀释法

制备0.5麦氏菌液,然后1:200稀释,使之最终浓度5×105CFU/ml,每孔加入100ml,过夜孵育后,不出现肉眼可见生长的最低药物浓度为该药对试验菌的最低抑菌浓度(MIC);E试验;孵育后围绕试条可形成一个椭圆形的抑菌圈,抑菌圈和试条的横向相交处的刻度读数为该抗菌药物对测试菌的最低抑菌浓度(MIC)。(MIC的读取应参照厂家的说明书);三、正确应用CLSI药物选择和报告规则;01;药物的选择;举例;例子一;例子二;0R-预测另一种药物;对于不动杆菌,亚胺培南和美罗培南之间没有“OR”

不能互推敏感性

;没有0R例子;什么细菌需选择哪些药做药敏及报告;阿奇霉素(15ug

ug/ml);2013-2014年药敏试验的情况;201410

铜绿假单胞菌

;CLSI对药敏试验中某些药物的警告;从脑脊液分离菌株不要报告以下药物;尿液分离菌;2015CLSI规则-磷霉素;耐甲氧西林葡萄球菌检测新规则;检测葡萄球菌对万古霉素敏感性;VISA-falsely“S”byprevious(CLSIM100-S18)vancomycindiskdiffusionbreakpoints…

VISA-用以前(CLSIM100-S18)的万古霉素纸片扩散法折点得到假“敏感”结果…;;01;标本:脓(左臀损伤)

诊断:局部脓肿

大量金葡菌;金葡菌-“D形抑菌圈试验”;诱导性克林霉素耐药(erm介导);罕见的耐药表型(复检);罕见的耐药表型(复检);01;正确选择标准菌株开展药敏质控;培养箱温度

培养时间控制

MH培养基、药敏纸片

菌龄、菌的纯度

菌悬液浊度

药敏卡/盘

标准菌株保藏

依据药敏标准规范操作;药敏质量控制;Thankyou!

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