DB34T 1536-2011 水产品中酸性橙II和酸性金黄G(皂黄)的测定 液相色谱-串联质谱法　　.docxVIP

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DB34

安徽省地方标准

DB34/T1536—2011

水产品中酸性橙IⅡ和酸性金黄G(皂黄)的测定液相色谱-串联质谱法

DeterminationofAcidOrangeIlandMetanilYellowinaquaticproductsbyhighperformanceliquidchromatographytandemmassspectrometry

2011-11-15发布2011-12-15实施

安徽省质量技术监督局发布

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DB34/T1536—2011

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省质量技术监督局、安徽省食品质量安全检验方法标准化技术委员会提出。本标准由安徽省食品质量安全检验方法标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：国家农副加工食品质量监督检验中心、安徽国家农业标准化与监测中心。本标准主要起草人：何俊、徐彦辉、顾亮、丁磊、董思恩、沈宏林、程浩、谭炜。

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DB34/T1536—2011

水产品中酸性橙Ⅱ和酸性金黄G(皂黄)的测定液相色谱-串联质谱法

1范围

本标准规定了水产品中酸性橙Ⅱ和皂黄的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于水产品中酸性橙Ⅱ和皂黄的测定。

本标准适用于该产品的风险预警监测及相关科学研究。本标准中酸性橙Ⅱ和皂黄检测限均为5.0μg/kg。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3原理

水产品中的酸性橙Ⅱ和皂黄用丙酮溶液提取，经弱阴离子交换固相萃取柱(WAX)净化后，液相色谱-串联质谱法测定，外标法定量。

4试剂

4.1除非另有说明，所用试剂均为分析纯试剂，水：GB/T6682规定的一级水

4.2甲醇：色谱纯。

4.3乙腈：色谱纯。

4.4甲酸：色谱纯。

4.5丙酮。

4.6氨水。

4.7固相萃取柱平衡溶液：0.5%甲酸水溶液。

4.8洗脱溶液：取5mL氨水，用甲醇定容至100mL。

4.9样品稀释液：称取0.39g乙酸铵用水溶解，加0.50mL甲酸，用水定容至500mL。

4.10流动相A:称取0.39g乙酸铵用水溶解，加0.20mL氨水，用水定容至1000mL。

4.11流动相B:乙腈。

4.12弱阴离子交换固相萃取柱(WAX):60mg/3mL,使用前依次用3mL甲醇、3mL水以及3mL固相萃取柱平衡溶液(4.6)活化。

4.13标准品：酸性橙Ⅱ和皂黄，纯度大于98%。

4.14标准储备液(0.10mg/mL):称取适量酸性橙Ⅱ和皂黄标准品，分别用甲醇配成0.10mg/mL的标准储备液，-18℃保存，保存期为六个月。

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DB34/T1536—2011

4.15混合标准储备溶液(1μg/mL):吸取酸性橙Ⅱ和皂黄标准储备溶液(4.13),用甲醇稀释成1μg/mL,-18℃保存，保存期为三个月，使用前回温到室温。

4.16混合标准工作溶液：根据需要，临用前吸取一定量的混合标准储备溶液(4.14),用50%甲醇水溶液稀释成适当浓度的混合标准工作液。

5仪器和设备

5.1液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾(ESI)离子源。

5.2高速离心机：10000r/min。

5.3超声波水浴。

5.4固相萃取装置。

5.5氮气吹干仪。

5.6旋涡混匀器。

5.7pH计。

6测定步骤

6.1提取

称取5.00g试样于50mL离心管中，加入5g无水硫酸钠和20.0mL丙酮，匀浆2min,超声提取30min,旋涡混匀，10000r/min离心10min,上清液转移至100mL鸡心瓶中；残渣中再加入20.0mL丙酮，重复提取一次，合并两次提取溶液，45℃下旋蒸至近干，加入5mL0.5%甲酸水溶液，旋涡混匀后待用。

6.2净化

弱阴离子固相萃取柱，使用前依次用3mL甲醇、3mL水以及3mL固相萃取柱平衡溶液(4.6)活化，样品提取液全部过柱，再依次用0.5%甲酸水溶液，甲醇各3m