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正交试验法优选川芎药效成分的超临界流体萃取工艺

该研究以川芎中阿魏酸、洋川芎内酯-I、洋川芎内酯-H、瑟丹酸内酯、丁

基苯酞、阿魏酸松柏酯、藁本内酯、丁烯基苯酞、双藁本内酯、欧当归内酯A

等10种药效成分及总药效成分产率为评价指标，通过4因素3水平正交试验设

计，综合考察了萃取温度、萃取压力、二氧化碳流速和夹带剂乙醇的浓度等因素

对上述10种药效成分和总药效成分产率的影响，优化得到了川芎药效成分的最

佳提取工艺为萃取温度60℃，萃取压力25MPa，二氧化碳流速1L·min1，夹

带剂（无水乙醇）质量分数8%。验证试验表明工艺稳定可靠，该法的川芎总药

效成分产率高于药典中回流提取法。

标签：川芎；超临界流体萃取；药效成分；正交试验

川芎为伞形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根茎，具有活血行

气、祛风止痛之功效，主治胸痹心痛、胸肋刺痛、跌打肿痛、月经不调、经闭痛

经、癥瘕腹痛、头痛、风湿痹痛等[1]。目前，有关川芎的超临界流体提取方法

研究主要是以阿魏酸[2-6]、川芎嗪[7]、藁本内酯[8]或挥发油[6，8]的产率为评价

指标。然而，中药发挥药效通常是其所含多种活性成分共同作用的结果，仅以1

或2种成分作为评价指标对工艺评价不尽合理。因此，本研究采用正交试验法，

以川芎中已明确为药效成分的阿魏酸、洋川芎内酯-I、洋川芎内酯-H、瑟丹酸内

酯、丁基苯酞、阿魏酸松柏酯、藁本内酯、丁烯基苯酞、双藁本内酯、欧当归内

酯A等10种成分以及总药效成分的产率作为考察指标，对影响超临界流体萃取

效果的萃取温度、萃取压力、二氧化碳流速和夹带剂浓度进行优选，以确定最佳

提取工艺条件，为川芎的进一步研究和开发提供依据。

1材料

DionexUltimate3000型高效液相色谱仪（光电二极管阵列检测器、

Chromeleon色谱工作站；）XS105型电子天平（瑞士MettlerToledo公司）；Spe-ed

SFE型超临界萃取仪（美国Applied-Separations公司）；HGC-12氮吹仪（天津恒

奥科技发展有限公司）。

阿魏酸、洋川芎内酯-I、洋川芎内酯-H、瑟丹酸内酯、丁基苯酞、阿魏酸松

柏酯、藁本内酯、丁烯基苯酞、双藁本内酯、欧当归内酯A对照品为本实验室

自制（HPLC归一化分析，纯度均大于98%，结构鉴定数据与文献报道一致）；

甲醇为色谱纯；水为超纯水；无水乙醇、冰醋酸为分析纯；二氧化碳（纯度大于

99%）由天津市四知气体有限公司提供。

川芎药材购于天津中新药业药材公司并被鉴定为伞形科多年生草本植物川

芎L.chuanxiong的干燥根茎，产地为四川灌县，样本存于天津大学药物科学与技

术学院天然药物化学实验室。

2方法与结果

2.1HPLC测定方法的建立

2.1.1色谱条件[9-10]CapcellPakC18色谱柱（4.6mm×150mm，5μm）；流

动相甲醇（A）-0.5%冰醋酸溶液（B），梯度洗脱，0～32min，30%～85%A，

32～39min，85%～100%A；检测波长280nm；流速0.7mL·min1；柱温30℃；

进样量10μL。混合对照品和超临界流体萃取产物的HPLC图见图1。

2.1.2混合对照品溶液的制备，标准曲线绘制及精密度考察相关试验参见文

献[9]。

2.1.3供试品溶液的制备精密称定超临界流体萃取产物24mg于10mL量

瓶中，加甲醇溶解，定容至10mL，摇匀，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液作为

供试品溶液。

2.1.4稳定性考察取同一份供试品溶液，分别在制备后0，2，4，8，12，

24h，按2.1.1项下色谱条件测定，记录峰面积。结果表明阿魏酸、洋川芎内酯-I、

洋川芎内酯-H、瑟丹酸内酯、正丁基苯酞、阿魏酸松柏酯、藁本内酯、正丁烯基

苯酞、双藁本内酯和欧当归内酯A峰面积的RSD分别为1.9%，1.0%，0.95%，

1.1%，1.9%，1.1%，1.1%，1.7%，1.5%，1.3%，说明10种药效成分均在24h

内稳定。

2.1.5重复性试验取川芎样品5份，精密称定，按2.1.3项下平行制备5份

供试品溶液，以2.1.1项下色谱条件进行测定，记录峰面积，标准曲线法计算含

量和