犬猫组织切片的制作试验指导.pdfVIP

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小动物疾病防治专业

动物组织胚胎学综合性实验

犬猫组织切片的制作

实验指导

李玉谷编

华南农业大学兽医学院

二零零四年六月

犬猫组织切片的制作

实验指导

李玉谷编写

张媛整理

李楚宣审校

目录

概述………………………2

实验一动物麻醉与组织取材…………3

实验二组织固定………5

实验三组织冲洗与脱水………………8

实验四组织透明、浸蜡与包埋………11

实验五组织切片、贴片与烤片………14

实验六组织切片染色…………………15

1

概述

一、本实验的目的

动物组织制片的方法,最主要的和最常用的是石蜡包埋切片法,

该方法广泛应用于动物组织学、病理学、生物学等许多学科和临床实

践中。石蜡包埋切片法的基本原理,是将石蜡渗入组织内作为支持物,

然后用切片机将组织切成薄片,经染色后在显微镜下观察。

本综合性实验,要求同学们学会犬、猫组织的石蜡包埋切片,HE

染色标本的制作过程。通过该实验,掌握犬、猫组织的取材、固定、

脱水、透明、浸蜡、包埋、切片和HE染色等基本方法和操作技能,

为今后临床病理诊断等奠定基础。

二、本实验所需的仪器设备

光学显微镜、石蜡切片机、组织脱水机、石蜡包埋机、磨刀机、

染色机、染色缸、切片架、载玻片、盖玻片、冰箱、恒温箱、干燥箱、

天平、酸度计、离心机、定时钟、解剖器械、玻璃器皿,等等。

三、本实验所需的主要试剂

组织固定剂(10%福尔马林等)、组织脱水剂(酒精等)、组织透明

剂(二甲苯等)、组织包埋介质(石蜡等)、染色剂(苏木精、伊红等)、

分色剂(1%盐酸酒精等)、封片剂(中性树胶)等。

2

实验一动物麻醉与组织取材

一、动物麻醉

猫或狗一只,用3%~4%戊巴比妥钠,按1ml/kgw静脉注射或腹腔注射;

或按5ml/kgw腹腔注射20%氨基甲酸乙酯;或按使用说明书注射其他麻醉剂。

二、组织取材

组织取材是制片的一个重要技术问题,必须根据具体要求,确定取材的部

位和方法。否则,对所观察的组织结构,不是看不到,就是看不全。因此,在

取材之前,必须弄清所取组织器官的解剖位置、组织结构特点等,同时,还要

掌握实际的操作技术,不能随意切取组织器官。

(一)取材顺序

在麻醉状态下,取下心、肝、脾、肺、肾、淋巴结、胰、小肠、大脑等主

要器官的小块组织,立即置于固定剂中进行固定。一般说来,先取腹腔内的脏

器,然后取胸腔、骨盆腔内的脏器,最后开

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