一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法及应用.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN103898159A

(43)申请公布日2014.07.02

(21)申请号CN201410155088.4

(22)申请日2014.04.17

(71)申请人中国科学院水生生物研究所

地址430071湖北省武汉市武昌东湖南路7号

(72)发明人孙永华庞少臣王厚鹏朱作言康景轩

(74)专利代理机构武汉宇晨专利事务所

代理人王敏锋

(51)Int.CI

C12N15/85

A01K67/027

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

一种提高鱼类omega-3多不饱和脂

肪酸的方法及应用

(57)摘要

本发明公开了一种提高鱼类omega-

3多不饱和脂肪酸的方法及应用，其步骤

为：1，构建fat2转基因鱼类家系；2，构

建fat1转基因鱼类家系；3，以两个转基因

家系为亲本，杂交获得同时表达fat2和

fat1基因的富含omega-3多不饱和脂肪酸

的双转基因家系。在本方法中，通过转基

因引入的fat2和fat1基因填补了鱼类体内

从头合成多不饱和脂肪酸通路的断裂，使

得转基因鱼获得从头合成omega-3多不饱

和脂肪酸的能力，利用该方法可获得高

omega-3多不饱和脂肪酸含量的鱼类产

品，能有效运用到经济性鱼类的转基因育

种中。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法，其步骤如下：

A、建立ifat2/i和ifat1/i基因的转基因鱼家系：

将转基因表达载体pCMV:fat2,CMV:mCherry和pCMV:fat1;CMV:EGFP表达载体分

别导入鱼类受精卵中，筛选出F0代转基因鱼；

所述的表达载体pCMV:fat2,CMV:mCherry的核苷酸序列为SEQIDNO.2所示；

所述的表达载体pCMV:fat1;CMV:EGFP的核苷酸序列为SEQIDNO.3所示；

B、将步骤A中获得的F0代转基因鱼饲养至性成熟与野生型鱼交配，筛选出F1代

转基因鱼，将F1代转基因鱼再与野生型鱼交配，筛选出F2代转基因鱼；

C、步骤B中获得转基因F2或F1代鱼为亲本，杂交筛选出同时表达ifat2/i和

ifat1/i的双转基因鱼即可。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：建立转基因鱼品系是通过显微注射结

合荧光蛋白表达筛选的方式进行。

3.权利要求1所述的方法在制备富含omega-3多不饱和脂肪酸转基因鱼中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述的转基因鱼为转基因斑马鱼、鲤

鱼、团头鲂或黄颡鱼。

说明书

p技术领域

本发明属于水产经济动物基因工程育种技术领域，涉及一种提高鱼类omega-3多不

饱和脂肪酸的方法及应用，具体涉及促进多不饱和脂肪酸合成的两个去饱

和酶fat2和fat1重组基因，涉及这两个重组基因表达载体的制备方法，

还涉及这两个重组基因共同配合使用的方法，以及该方法在鱼类基因

工程育种中的用途。

背景技术

Omega-3多不饱和脂肪酸，包括DHA和EPA是一类有利于人体健康的脂肪酸。越

来越多的流行病学和临床调查表明，EPA和DHA对很多疾病有预防和缓

解的作用，这些疾病包括动脉粥样硬化、心血管疾病、中风、神经疾病、

肥胖、2型糖尿病、癌症和自身免疫疾病。