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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利说明书
(10)申请公布号CN103898159A
(43)申请公布日2014.07.02
(21)申请号CN201410155088.4
(22)申请日2014.04.17
(71)申请人中国科学院水生生物研究所
地址430071湖北省武汉市武昌东湖南路7号
(72)发明人孙永华庞少臣王厚鹏朱作言康景轩
(74)专利代理机构武汉宇晨专利事务所
代理人王敏锋
(51)Int.CI
C12N15/85
A01K67/027
权利要求说明书说明书幅图
(54)发明名称
一种提高鱼类omega-3多不饱和脂
肪酸的方法及应用
(57)摘要
本发明公开了一种提高鱼类omega-
3多不饱和脂肪酸的方法及应用,其步骤
为:1,构建fat2转基因鱼类家系;2,构
建fat1转基因鱼类家系;3,以两个转基因
家系为亲本,杂交获得同时表达fat2和
fat1基因的富含omega-3多不饱和脂肪酸
的双转基因家系。在本方法中,通过转基
因引入的fat2和fat1基因填补了鱼类体内
从头合成多不饱和脂肪酸通路的断裂,使
得转基因鱼获得从头合成omega-3多不饱
和脂肪酸的能力,利用该方法可获得高
omega-3多不饱和脂肪酸含量的鱼类产
品,能有效运用到经济性鱼类的转基因育
种中。
法律状态
法律状态公告日法律状态信息法律状态
权利要求说明书
1.一种提高鱼类omega-3多不饱和脂肪酸的方法,其步骤如下:
A、建立ifat2/i和ifat1/i基因的转基因鱼家系:
将转基因表达载体pCMV:fat2,CMV:mCherry和pCMV:fat1;CMV:EGFP表达载体分
别导入鱼类受精卵中,筛选出F0代转基因鱼;
所述的表达载体pCMV:fat2,CMV:mCherry的核苷酸序列为SEQIDNO.2所示;
所述的表达载体pCMV:fat1;CMV:EGFP的核苷酸序列为SEQIDNO.3所示;
B、将步骤A中获得的F0代转基因鱼饲养至性成熟与野生型鱼交配,筛选出F1代
转基因鱼,将F1代转基因鱼再与野生型鱼交配,筛选出F2代转基因鱼;
C、步骤B中获得转基因F2或F1代鱼为亲本,杂交筛选出同时表达ifat2/i和
ifat1/i的双转基因鱼即可。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:建立转基因鱼品系是通过显微注射结
合荧光蛋白表达筛选的方式进行。
3.权利要求1所述的方法在制备富含omega-3多不饱和脂肪酸转基因鱼中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述的转基因鱼为转基因斑马鱼、鲤
鱼、团头鲂或黄颡鱼。
说明书
p技术领域
本发明属于水产经济动物基因工程育种技术领域,涉及一种提高鱼类omega-3多不
饱和脂肪酸的方法及应用,具体涉及促进多不饱和脂肪酸合成的两个去饱
和酶fat2和fat1重组基因,涉及这两个重组基因表达载体的制备方法,
还涉及这两个重组基因共同配合使用的方法,以及该方法在鱼类基因
工程育种中的用途。
背景技术
Omega-3多不饱和脂肪酸,包括DHA和EPA是一类有利于人体健康的脂肪酸。越
来越多的流行病学和临床调查表明,EPA和DHA对很多疾病有预防和缓
解的作用,这些疾病包括动脉粥样硬化、心血管疾病、中风、神经疾病、
肥胖、2型糖尿病、癌症和自身免疫疾病。
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