北师版高中生物学选择性必修3生物学技术与工程精品课件 第3章 基因工程 第三节 第1课时 目的基因的获得和基因表达载体的构建.pptVIP

知识点一目的基因的获得【问题引领】围绕转基因抗虫棉的培育这个案例,阅读教科书第91~95页的内容,思考并讨论下列问题。(1)在该项目中,目的基因是什么?最初获得这种目的基因的方法属于哪种?提示:培育转基因抗虫棉的目的基因是来自苏云金芽孢杆菌的Bt抗虫基因,简称Bt基因。最初获得Bt抗虫基因的方法属于从基因组文库中分离目的基因。(2)在PCR技术中,为什么不直接加入解旋酶对DNA进行解旋?为什么要求所加入的DNA聚合酶具有耐热的特性?子链的合成为什么需要引物?提示:DNA解旋酶既可以打开双链模板DNA,又可以打开模板DNA与引物结合的部分,会导致复制与解旋不断地重复而达不到扩增效果。因此PCR反应中利用高温条件代替解旋酶使DNA解旋。PCR反应需要高温变性,因此需要耐热的DNA聚合酶。DNA聚合酶只能将单个的脱氧核苷酸连接到已有的DNA片段上,因此需要一段已知序列的DNA作为引物。(3)PCR扩增目的基因是获得目的基因的唯一方法吗?请说明理由。提示:不是。还可以从基因组文库、cDNA文库以及利用化学反应获得目的基因。【归纳提升】1.几种目的基因获得方法的比较2.PCR的相关知识(1)原理:类似于生物体内的DNA双链复制过程。(2)过程PCR包括20~50个不等的重复扩增循环,每个循环由变性—复性—延伸三个基本步骤组成。(3)条件:PCR缓冲液、模板DN