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酸奶对小鼠肠道微生物活性和免疫功能的影响
关键词:酸奶肠道微生物免疫功能疲劳指数胸腺指数脾脏指数
酸奶是以新鲜牛乳为原料,添加适量的糖,经过巴氏灭菌和冷却后加入乳酸菌制
剂,在适宜的条件下进行发酵的乳制品。在注重健康和养生保健的今天,酸奶制
品越来越受到人们的青睐,酸奶不但含有人体生长发育所需的蛋白质、维生素和
微量元素,而且还具有整肠作用、抗菌作用、调整胃肠功能、降低胆固醇、抗癌
等保健功能。已有研究表明酸奶有益于人体健康,包括改善胃肠道功能,调节肠
[1][2]
道正常菌群以及对人体免疫系统具有显著的促进作用。酸奶是我国的主要乳制
品,我国消费量比较大,在20年来的研究中发现,乳酸菌在体液免疫和细胞免疫中
[3]
发挥着调节作用,使酸奶在国内外掀起一阵阵热潮,接连受到大家的追捧。研究
[4]
表明乳酸菌和酸奶具有免疫增强作用是由于酸奶引起胃肠道微生物发生改变,肠
[5][6]
道中乳酸菌的增加可抑制其它病菌的生长繁殖。此外通过酸奶人体研究表明饮
[7][8][9][10][11]
用酸奶使细胞因子产量和抗体产量增加,吞噬活性、T细胞功能和自然
[12]
杀伤细胞活性增强。近几年,在国外曾有些报道是对酸奶生理功能的研究,但
在国内很少有这方面的研究报道,特别是酸奶对肠道微生物活性和免疫功能的影
响,尚未有研究报道,所以进行这方面的研究,不但对消费者合理地储存和消费
酸奶提供理论依据,而且对促进我国乳品工业的发展及人类健康都有一定的现实
意义。
1材料方法
1.1材料:某品牌市售酸奶(含活性乳酸菌)、EMB和MRS固体培养基、健康小
鼠5只、结晶紫染液
1.2仪器:各小组根据实际情况,结合试验步聚,自行收集和准备,但共用仪器(如
温箱、PCR仪等)设备除外。
1.3方法
1.3.1小鼠模型建立:用实验准备酸奶饲喂小鼠,任其自由采食,连续饲喂
六天,每天观察小鼠临床状态,并做好记录。
1.3.2小鼠称重:试验组和对照组小鼠每天均需要称重1次,并做好详细记
录。称重一直持续至前处理试验结束为止。
1.3.3小鼠疲劳指数检测:在实验前进行小鼠疲劳指数测定,将小鼠置于装
有清水的桶中,让其自由在水中游泳,观察其状态,记录小鼠溺水时间。
1.3.4免疫器官指数测定:对取过腹水的小鼠进行无菌解剖。剥离胸腺、脾
脏和肠道至无菌离心管中,称重,计算免疫器官指数。
免疫器官指数=免疫器官重(g)/小鼠体重(kg)
1.3.5白细胞功能测定:取离心管1支,加肝素20μl,加外周血100μl,混匀。
1/9
加入过滤墨汁10μl,混匀,加塞。置37℃温育4h。取温育后样本,推制成血涂
片,干燥后,用甲醛固定,待细胞变白后,经结晶紫或美兰染色,用油镜观察。
油镜下观察计数幼稚细胞或中性成熟粒细胞100个;计数单核细胞20个。
【判断结果】
根据细胞吞噬墨粒多少及大小,可定为下列程度:
阴性:细胞内未见吞噬墨粒。
阳性:(+)细胞内吞噬有小墨粒1~5个。
(++)细胞内吞噬有大小不等墨粒10个左右。
(+++)细胞内吞噬有大墨粒10个左右,小墨粒较多。
(++++)细胞内吞噬有多数大颗墨粒,并有块状、球状,小墨粒很多,但细
胞核清楚。
计算吞噬率及吞噬指数
【注意事项】
肝素剂量对白细胞的吞噬功能有影响,肝素用量过大,细胞形态
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