生化实验---绪论及蛋白质沉淀变性反应(共38张课件).pptxVIP

生物化学实验室规那么〔1〕;生物化学实验室规那么〔2〕;实验室平安--平安用电;实验室平安--防止火灾;实验室内严禁贮存大量的易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇，苯等)。

必须存放的少量即将使用的易燃物，也应将它放在远离火源处，火焰熄灭后才可大量倾倒这些液体。

低沸点的有机溶剂不准在火焰上直接加热，只能利用带回流冷凝管的装置在水浴上加热或蒸馏。

;2、举例说明蛋白质变性和沉淀之间的关系。

实验室内严禁贮存大量的易燃物！

常用此法来分离和纯化蛋白质。

机械损伤：立即止血，到医院诊治。

操作戴手套，必要时戴口罩或防毒面具，并在通风橱中进行。

化学试剂有相对无毒、中度毒性和剧毒之分，在处理剧毒药物时要特别谨慎、小心。

②3-4滴3%硝酸银溶液

检查电器设备是否漏电时，应使用试电笔。

实验报告分为以下几局部：

使用毒性物质和致癌物必须根据试剂瓶上标签说明严格操作，平安称量、转移和保管。

操作戴手套，必要时戴口罩或防毒面具，并在通风橱中进行。

实验室平安--平安用电

7、脂肪酶活性的测定 11月14-15

浓度较高的蛋白质溶液，实验现象更明显。

用吸量管量取这些试剂(包括有毒物)时，必须使用橡皮球，绝对不能用口吸取。;名称;易燃物蒸汽在空气中的爆炸极限;实验室平安--严防中毒;实验室平安--严防中毒;;;;;;实验室平安--防止烧伤和创伤

;实验室平安--防止火灾

汽油、乙醚等有机溶剂：石棉布、沙土

2、了解蛋白质的沉淀反响、变性作用和凝固作用的

10、 维生素C的定量测定12月5-6

3、严格听从教师的指导，及时记录实验原始数据。

实验报告分为以下几局部：

低沸点的有机溶剂不准在火焰上直接加热，只能利用带回流冷凝管的装置在水浴上加热或蒸馏。

强碱：先用大量自来水冲洗，再用5%硼酸溶液或

1%硫酸铜，饱和硫酸铜溶液，0.

机械损伤：立即止血，到医院诊治。

②数滴10%三氯乙酸溶液

浓度较高的蛋白质溶液，实验现象更明显。

②沿管壁加入6滴蛋白质溶液，

5、注意节约试剂，防止损坏仪器。

观察有无沉淀（清蛋白）析出;实验室急救1;实验室急救2;实验报告??撰写;实验内容及安排(72学时);实验内容及安排〔续〕;一、实验目的

1、了解蛋白质的一些理化性质，认识蛋白质的

可逆反响和不可逆反响。

2、了解蛋白质的沉淀反响、变性作用和凝固作用的

原理及它们的相互关系。

;蛋白质是由氨基酸组成的大分子化合物,其分子量颇大，介于一万到百万之间，是一种亲水胶体。

蛋白质分子外表的亲水基团〔-OH,-COOH,-NH3,以及肽键〕等，在水溶液中能与水分子起水化作用〔Hydration〕，使蛋白质分子外表形成一个水化层。每克蛋白质分子能结合克水。

蛋白质分子外表上的可解离基团，在适当的PH条件下，都带有相同的净电荷，与其周围的反离子构成稳定的双电层。;由于蛋白质溶液具有水化层和双电层两方面的稳定因素，所以胶体系统是相当稳定的。

在一定物理化学因素(如盐析、重金属离子、有机酸、无机酸和加热)影响下,蛋白质颗粒失去电荷，脱水，甚至变性，以固态形式从溶液中析出，这个过程称为蛋白质的沉淀反响。这种反响可分为两种类型：

1、可逆沉淀反响：蛋白质分子内部结构并未发生显著变化，根本保持

原有的性质，沉淀因素除去后，能溶于原来的溶剂中。

2、不可逆沉淀反响：蛋白质分子内部结构、空间构象遭到破坏，

失去原来的天然性质。;蛋白质溶液的沉淀

稳定是相对的，有条件的。

如果条件发生改变，破坏了蛋白质溶液的稳定性，蛋白质就会从溶液中沉淀出来。;;蛋白质沉淀变性的常见方法

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2.试剂

3%硝酸银，0.5%乙酸铅，10%三氯乙酸溶液，饱和硫酸铵溶液，10%氢氧化钠溶液，浓盐酸，浓硫酸，浓硝酸，5%磺基水杨酸，0.1%硫酸铜，饱和硫酸铜溶液，0.1%乙酸，10%乙酸，饱和氯化钠溶液，硫酸铵粉。

3.器材

水浴锅,漏斗,滤纸,吸管,试管及试管架,量筒等。

;四、实验内容;;;;2.蛋白质的不可逆反响

2.4加热沉淀蛋白质;操作步骤

编号;;1、蛋白质分子中哪些基团分别可以与重金属离子和有机酸作用而使蛋白质沉淀？

2、举例说明蛋白质变性和沉淀之间的关系。从原理上说明一个蛋白质沉淀的实用例子。